附錄 99.2

的早期安全性和有效性結果 P-BCMA-ALLO1，一種全異體 嵌合抗原受體 T 細胞 (CAR-T)，適用於復發/難治性多發性骨髓瘤 (RRMM) 患者 Bhagirathbai Dholaria、MBBS1、MD2、Andrew Kin、MD3、Adam Asch、MD4、Aravind Ramakrishnan、MD5、Carlos Bachier，MD6、Tulio Rodriguez、MD7、Leyla Shune、MD8、凱瑟琳·麥克阿瑟9、喬安妮·麥凱格、MS9、塞繆爾·德普里莫、phd9、克里斯托弗·馬丁、phd9、Phd9、Hamid Namini、phd9、Ellen Christie9、Rajesh Belani、MD9、Steff acey A. Cranert，phd9，Julia Coronella，phd9，Devon J.Shedlock，Phd9 和凱特琳·科斯特洛，MD10 1田納西州納什維爾範德比爾特大學醫學中心；2馬裏蘭大學瑪琳和斯圖爾特分校 格林鮑姆綜合癌症中心，馬裏蘭州巴爾的摩；3密歇根州底特律韋恩州立大學卡爾馬諾斯癌症研究所；4俄克拉荷馬城俄克拉荷馬大學健康科學中心；5聖彼得堡戴維莎拉大炮移植和細胞治療項目德克薩斯州奧斯汀市南奧斯汀醫療中心；6德克薩斯州聖安東尼奧衞理公會醫院的莎拉·坎農移植和細胞治療項目；7芝加哥希望之城，芝加哥，伊利諾伊州；8堪薩斯州韋斯特伍德堪薩斯大學醫學中心血液惡性腫瘤和細胞治療部 ；9加利福尼亞州聖地亞哥波塞達療法；10UC 聖地亞哥健康中心，摩爾斯癌症中心，加利福尼亞州拉霍亞市研究 P-BCMA-ALLO1-001：開放標籤、多中心、1 期研究較高的環磷酰胺 LD 劑量顯著增加了富含 T 的 P-BCMA-ALLO1 細胞向骨髓和背景 SCM 的流量，用於評估 RRMM P-BCMA-ALLO1 擴張患者的 P-BCMA-ALLO1 安全性。 44 天骨髓吸出 EFF 儘管取得了自體（自體（自體）CAR-T 等治療進展，但 MM 仍然是一種無法治癒的惡性腫瘤。Auto CAR-T 構成重大挑戰，因為 每位患者都必須接受血液分離術，並且每劑量 CAR-T 必須 P-BCMA-ALLO1 治療：S：2x106 細胞/kg P1：2x106 細胞/kg P2：2x106 細胞/kg A B 關鍵納入標準： 在第 0 天輸液 CD8 LD（Cy mg/m2）：300 500 1,000 CD4 需單獨製造。這會導致疾病 RRMM 的治療等待時間很長，具體定義為 IMWG CAR-T 細胞 CAR-T 細胞調理必須接受了 PI、imids 和 CD38 maB 或 106 106 106 進展，需要過渡治療，有時甚至死亡。 Auto CAR-T 還受到篩查隨訪 100 100 化療 T 三重難治性 EFF 偶爾出現生產失敗的阻礙，有些患者沒有接受治療或接受的長期劑量不足 105 105 80 80 T 2 ECOG 0 或 1 A 細胞細胞 EM 環磷酰胺（300、500 或 1,000 mg/m）和 NA CD27 T 隨訪 TCAR-T 劑量。由於無法在第 -5、-4、-3 天內使用氟達拉濱（30 mg/m2）生產 DN DN CD45RAT R 60 CM g 104 g 104 g 104 g 104 scale，而且與生產相關的成本很高，因此 患者能否廣泛獲得汽車 CAR-T 仍然具有挑戰性。Auto CAR-T 還源自接受了 P-BCMA-ALLO1 劑量和 LD 武器評估的患者 T 細胞、mmm CA CAR T SCM 主要終點以及每個隊列中注射的患者人數：i es/ es/ i es/ i 40 因暴露於免疫抑制性抗骨髓瘤 療法而受損。相比之下，同種異體 (allo) CAR-103 103 103 CD4 CD8 根據 DLT 6 A. 0.25 x 10 細胞/千克 (n=1) Cop Cop Cop f o 20 T，由健康的供體 細胞批量生產並可用 現成的也許能夠 B. 0.75 x 106 (n=7) 102 102 102% 次要目標 Arm S (Cy 300)；N = 21 克服上面描述的汽車 CAR-T 挑戰。C. 2 x 106 (n=9) 101 101 0 0 0 評估 P-BCMA-ALLO1 的抗骨髓瘤作用 6 0 7 14 28 35 42 56 63 0 7 14 21 28 35 49 56 63 0 7 14 28 35 49 56 63 P 6 P 6 P 6 研究細胞劑量和 LD 方案選擇的效果以指導 D. 6 x 10 (n=4) F W K F W K K P-BCMA-ALLO1，靶向 bcma 的哈羅適用於 RRMM 的 T 由健康的供體 T 細胞製成，在關鍵研究中採用研究日劑量選擇 E. 2 x 106 Arm P1（Cy 500）；N = 5 個研究日專有 基於轉座子的非病毒轉座子整合（PiggyBac® DNA 輸送系統）系統與表達 a F. 2 x 106 Arm P2（Cy 1,000）；N = 6 圖 4 A）CAR 染色和 骨骼人抗 Bcma V 的 CAR-T 表型、Cas-Clover 基因編輯和瞬態表達的 Booster B 骨髓單核細胞 (BMMC) 針對患者 #23（圖 2A，H 至少 4 周的隨訪；包括一名無法評估的 C T AUCD1-WK3 患者 max 圖 1 A) Arm S、P1 和 P2 中的 CK 以 2x106/kg 的細胞分子，生產出富含 T 幹細胞記憶 (T) 的產品。靜息T細胞中的基因編輯可消除輸液後第6周（第44天）的反應評估（紫色）。第一行 CD4+ SCM P = 0.0096 7 P = 0.0159 106 25 10 劑量並提高 Cy 劑量水平。缺少數據 CAR-T 細胞，底排 CD8+ CAR-T 細胞。B) 最終藥物內源性 T 細胞受體表達可防止 graft-vs-Host疾病（gvHD）以及 beta-2 106 分是由於 DNA 產量不足造成的。B) 患者 C/Tmax 產品 (FP) 表型 #23 與微球蛋白相比會降低 宿主 vs-graft對 MHC I 類的反應，同時保持理想的 T 快速便捷地給藥 CAR-T，按隊列顯示 A。只有 n=7 (S) n=4 y 5 CAR-T 表型按 CD4 和表型的 TSCM、TEM 和 TEFF 的百分比。基於T 的CAR-T細胞可以被視為前藥，因為它們必須在DNA DN 10 SCM 15 治療（ITT）人羣中擴張和分化，而Tmax所示 g 104 Da g（P1），因為骨體內一個CD8 CAR-T細胞（如A中的象限門所示）沒有信號 >LOD 才能產生效應因子 CAR-T 或藥物。雖然 T 細胞與汽車 CAR-T m m 104 SCM s/es/ 每組受試者的臨牀益處相關。第 6 周使用鄧恩的骨髓標本進行 Kruskal-Wallis 測試。BCMA-10 (NCT03288493) 的門控策略，但所有CAR-T的門控策略尚未得到證實。對於 100% 的 ITT 人羣進行了 LD 並接受 P-BCMA-ALLO1 103 研究 103 名患者進行了篩查（1 名患者在 數據刪減後尚未開始 LD）Copie Copi 多重比較測試；具有範圍的中位數是圖中描述的 CAR CAR-T 細胞和 CAR-T 亞羣。 3. allo CAR-T 擴張、植入、分化和持久性所需的淋巴消耗 (LD)。所示 5。qPCR 的 LOD 為 100 cp/µg。CK = 細胞 102 102 患者無需橋接 治療 101 101 動力學；PBMC = 外周血單核在這裏，我們介紹了 P-BCMA-ALLO1 的 1 期研究（NCT04960579）的早期結果，顯示從入組到：S P1 P2 S P1 P2 S P1 P2 細胞；cp/mg = DNA 的轉座子副本/毫克。令人信服的安全性和自動性 類似 Car-T經過大量預處理的 RRMM 患者的反應率。P-BCMA-在 BCMA 天真和 39 名入組患者（ITT）中，反應深度且反應率高。LD 的起始時間為 1 天（範圍為 0-10）天 ALLO1 可以快速給藥 給無需血液置換術或製造時間較長的患者，並且在之前接受過自動 CAR-T 的患者中表現出活性。假設，富含 T 的 P-BCMA-P-BCMA-ALLO1 在暴露 BCMA 治療前 7 天（範圍為 5-15），RRMM 患者 SCM P-BCMA-ALLO1 顯示外周細胞 ALLO1 細胞向骨髓的持續流動，擴大、分化為效應體表型並顯示 38 名患者淋巴消耗總數包括：一名 患者加入循環管理組（隊列 2）；一名患者在隊列中撤退 ort 2 劑量；並給藥 P-BCMA-ALLO1 一名不可評估的患者和 4 名患者，隨訪 4 周。對患者的中期安全性分析（n = 34）持久性。我們的數據突顯了優化的環磷酰胺劑量對注射 P-BCMA-ALLO1（包括撤退）和至少 4 周隨訪的體內影響。P-BCMA-ALLO1 在 RRMM 中的療效、血液和骨髓細胞動力學和的臨牀活性。對可評估反應的患者（n = 19）進行劑量水平 2 × 106 個細胞/kg 的分析。ITT = 意向治療在註冊時定義。安全性和有效性分析的數據截止日期為 2023 年 10 月 23 日。3 A B scR 採用專有的、 的非病毒方法生產富含 T 的、完整的患者 #23 和 #30 Patient #30 **（均為 PBMC）患者 #23 ** 3 SCM CR 研究招收了大量預先治療的患者羣體 D10 WK2 WK3 WK4 WK6 (BMA) WK6 (PBMC) 600000 患者 #23 GPR 異體 P-BCMA-ALLO1 來自健康捐贈者的 CAR-T 350000 qPCR (cp/µg) 345,562 114,115 37,549 19,566 ~69k* 932 患者 #30 100000 PR 患者特徵人數（總計 n = 33）所有 g 80000 淋巴細胞中的 DNA 100000% CAR-T 31.1 n/a 5.94 4。6 13.8 n/a 平均年齡（最小、最大）歲 68（33、85）m BMA #23 * PiggyBac® 基因插入 5 60000 *qPCR 是對源自 BMA 的 DNA 進行的。標準曲線效率為雌性 n (%) /雄性 n (%) 21 (64) /12 (36) 副本/40000 86%，低於我們的驗收標準 (90%)；因此，結果是 P-BCMA-ALLO1 Transposon Design 表示為近似值。n/a：由於自診斷以來 20000 年 PBMC 計數不足而未進行檢測，即 6.27 年（1.48、18.95 年）FACS 和 qPCR 檢測。3 絕緣體絕緣體優先達到 0 **MM 反應：患者 #23 和 VGPR（患者 #30）ITR 啟動子 Poly (A) ITR 轉位幼稚 T IgG g，20 (61)，IgA，9 (27)，iGD， 1 (3) 0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 TTAA 細胞產生 T piggyBac 轉座子 SCM 骨髓瘤診斷亞型，n (%) Kappa FLC，21 (64)，Lambda FLC，12 (36) 學習日豐富產品系統插件安全開關車分子選擇基因其他： 全血細胞計數異常，患者 #23 中有 1 (3) A) CK，受試者 #23 的外周血 (PBMC) 和骨髓穿刺物 (BMA) 中有 #30。B) 轉基因編碼大載貨容量 PiggyBac PiggyBac 提供 CAR，即誘導的高風險 細胞遺傳學，n (%) 10 (30) qPCR 信號，與 Flow 識別的 CAR-T 細胞頻率（以總計 CD45+ 活單細胞的百分比表示）。以 BCMA 為導向的 CAR DNA 轉座子 RNA 轉座酶 ITR CARGO ITR 安全開關，並在 PBMC 和 BMMC 上對患者 #23 的骨髓樣本進行 Flow。缺少數據點是由於先前治療中位數（最小值、最大值）、n 7（2、17）5 DNA 產量中可選標記不足 3 5。BM = 骨髓。BMA = 骨髓抽吸液。BMMC = 骨髓單核細胞。單步先行抗 BCMA CAR-T 和抗 BCMA 療法，n (%) 13 (39) 剪切粘貼基因組 DNA 包括一名無法評估反應評估的患者 ITR CARGO ITR 患者外周血樣本顯示 P-BCMA-ALLO1 圖 5數據截止時間：2023 年 10 月 23 日。ORR 目標 反應率，達到 scR、CR、VGPR 或 PR，包括 T 細胞向 T 表型的分化得到證實和未證實的反應。可評估患者：IMWG 獲得的首次反應評估 m-protein P-BCMA-ALLO1 在 RRMM 患者 SCM EFF 標準或 PD/Death 中具有良好的耐受性。費舍爾精確檢驗用於計算手臂 S 與 P1 和 P2 相比的 P 值。cas-Clover 基因編輯 A 兩名之前接受過 BCMA auto CAR-T (idecabtagene viclecel) 的 P2 患者和 P-BCMA-101），兩者都實現了 VGPR。一小部分（n=5）的患者接受了 MRD 狀態檢測，其中兩名患者為 MRD（10-5）。一隻手臂少一隻手臂 之前接受 BCMA auto CAR-T 的患者達到了 SD。P1組和P2組的兩名無反應患者具有差異化左gRNA，作為先前的治療接受了泰克利他單抗治療；不包括這兩名患者 ，這兩個組的ORR為100％。單臂 P1 Clo051 患者 t (4:14) 的高編輯效率實現了 MRD VGPR。高保真基因編輯靜息 T 細胞生成 SCM CM EM EF 系統用於處理 T 幹細胞中央存儲器 T 細胞效應器記憶 T 細胞效應器 T 細胞效應器 T 細胞 SCM ORR 未顯示在條形圖中：組 S 隊列 -1（0%；0/1 pt）；組 S 隊列 1（43%；3/7 分）；手臂 S 隊列移植與宿主 和宿主 3 5 記憶 T 細胞低到不偏離目標非自更新 3（0%；0/4 分）；手臂 C 隊列 2（0%；0/1 pt）；撤退的患者隊列 2（100%；1/1 pt）與移植物異體反應性自我更新切除短 壽命長SpecializedCytostic Right gRNA 編輯包括 TCR 和多能結論 B2M (MHC I) 基因敲除術 dcas9 C P-BCMA-ALLO1 很有前途 現成的使用非病毒基因 Madison 等人制造的富含 tscm 的異體 CAR-T 療法，《分子療法核酸》，2022 年。(https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S216225312200155X) B 第 10 天第 3 周第 4 周這些第 1 階段結果顯示的編輯技術是：從 批量庫存中交付給患者，使用符合所有質量規格的藥物產品可以快速治療 100% 的 ITT 人羣 CD27 CD4 CAR-T 細胞 CD8 CAR-T 細胞 CD45RA 100 100 耐受性良好，沒有 gvHD，CRS 發生率低，神經毒性 Gr 2 高產臨牀製造 TEFF 細胞 80 T P-BCMA-ALLO1 的活性與 中的自體 BCMA CAR-T 相當經過大量預處理的 RRMM pts EM T T60TCM 總回覆率為 82% 包括 BCMA 未接受治療的患者和 BCMA 在合併的 CAR 60 TSCM P1/P2 隊列（總計 n=11 分）中接受足夠淋巴消耗的患者，在所有接受任何治療（包括自動 BCMA 定向的 CAR-T）中，除了 T 細胞分離安全性摘要：S=Cy 300 的生產過程 20 20 BCMA 為導向的雙特異性 T 細胞參與療法 teclistamab (n=9) 異體 非病毒基因編輯 P1=Cy 500%% 可以保存 T在合併的 P1/P2 BCMA 未接受治療的患者（n=7）中，在沒有 DLT 的情況下清除了 6 × 106 個細胞/千克的劑量水平 100% ORR，最高的 LD SCM 0 0 表型 P2=Cy 1000 CAR (P2) 隊列中均未觀察到 gvHD F 1 K F 1 K K CD3 CD45RA D W W W D W W 幾乎所有攜帶汽車的深度臨牀反應都是在高危疾病 3 級患者中觀察到的 TeaE 主要與 LD 和骨髓瘤細胞相關（圖 3 A) TSCM 分化途徑。B) CAR-T 細胞的表型（活單細胞 CD3-BCMA+ 的百分比，CD45+CD2+，與富含 T 的 產物的假設機制一致，類似 T 的 P-BCMA-ALLO1 細胞表現為低發病率 (21%)，嚴重程度為 2 級 SCM 劑量按需交付 CD4+ 或 CD8+； CAR-T 鑑定為 BCMA 蛋白）血液隨時間推移（第 10 天、第 3 周和第 4 周）植入、擴張、分化為 T 表型和持續性，如第 44 天觀察到的患者骨髓 Arm S 14% (n=3)、手臂 P1 20% (n=1)、手臂 P2 50% (n=3) EFF#30 基於 CD45RA 和 CD27 表達式（圖 2A，綠色）。顯示 D10 的代表性 CAR 染色；抽吸樣本在 2 名患者中觀察到的神經毒性（2 級） 內源 T 細胞被定義為 BCMA-CD3+。上排 CD4 CAR-T 細胞，底排 CD8 CAR-T 細胞。C) 含有環磷酰胺的最終藥物經過優化 LD 對於促進強健的細胞擴展 (Cmax) 和解鎖活性至關重要 S 組的一名患者和 P2 組的一名患者為患者開發了神經毒性產物 (FP) 表型 #30 與 CAR-T 表型進行比較 TSCM、TEM、TEM 和 TEFF 的 CD4 和 CD8 潛力即使在在指定時間點的 PBMC 樣本中，較高的 LD Arms Car-T 細胞（如 B 中的象限門所示）。P-BCMA-ALLO1 的進一步臨牀開發正在進行中鳴謝： 作者和 Poseida Therapeutics, Inc. 感謝患者、護理人員、研究人員和研究中心工作人員參與這種 Auto = 自體；AUC = 曲線下方區域；BCMA = B 細胞成熟 抗原；B2M = 2 微球蛋白；BMA = 骨髓吸出物；CK = 細胞動力學；CRS = 細胞因子釋放綜合徵；Cy = 環磷酰胺；DLT = 劑量限制毒性；ECOG = 東方合作腫瘤學小組；FLC = 遊離輕鏈；流感 = 氟達拉濱；gvHD = 移植物抗宿主病；iMID = 研究。這項研究由Poseida Therapeutics（加利福尼亞州聖地亞哥）贊助和資助。MWG = 國際骨髓瘤工作組；ITR = 末端倒置重複；ITT = 意向治療；LD = 淋巴消耗；LOD = 檢測極限；MHC = 主要組織相容性複合體；MTD = 多發性骨髓瘤；MTD = 最大耐受劑量；PBMC = 外周血單核細胞；PR = 部分反應；RRMM = 復發和難治性多發性骨髓瘤；scR = 中央記憶 T 細胞；Teae = 治療緊急不良事件；Teff = 效應 T 細胞；TEM = 效應記憶 T 細胞；TSCM = 幹 細胞記憶 T 細胞；VGPR = 非常好的部分反應請查看我們的其他 POSEIDA PRESENTATIONSA 含腫瘤小鼠異種移植模型作為評估的生物測定方法CAR-T 產品效力對臨牀表現顯示陽性 預測價值；出版編號：2293血友病A的有效基因療法：新型可重複給藥的非病毒配方，提供 穩定、持久的 FVIII 表達，提高耐受性；出版編號：1232