小组(B)

此外，根据截至2018年4月的中期数据，我们观察到，在健康的年轻和健康的老年人中，在第15天和第60天，T细胞反应相对于基线有所增加，他们接种了mRNA-1777的第2和第3剂量。

根据截至2018年4月9日的临时安全数据，mRNA-1777在年轻和老年人的剂量水平为1、2和3时，耐受良好，没有剂量限制毒性。截至2018年9月，仅在较年长的受试者中评估的最高剂量水平-第四剂量水平-没有低剂量水平更好的耐受性。然而，在所有治疗武器中，没有治疗相关的严重不良事件，或治疗紧急不良事件，或TEAES，导致退出，不良事件，或特别感兴趣的AEs，或新出现的慢性疾病或自身免疫紊乱的年龄组。临床上没有明显的实验室异常。

截至2018年9月19日，我们已经观察到9个学科的15个SAE，所有这些都被认为与研究产品无关。这些SAE发生在收到研究产品后约1~10个月，包括主动脉瘤修补术、麻痹性肠梗阻、脊髓减压、先前存在的心肌病死亡、疝、短暂缺血发作、周围血管紊乱、血管迷走性晕厥、诊断非小细胞肺癌、前交叉韧带撕裂、左膝肌腱撕裂、右膝关节肌腱撕裂、左髌骨脱位、右髌骨脱位和双侧髌骨肌腱修复。

基于与默克公司合作的临时安全性、耐受性和免疫原性数据，我们选择暂停mRNA-1777的进一步开发。默克公司正在美国进行第一阶段的mRNA-1172试验.

CMV疫苗(mR-1647)概述

我们的CMV计划针对先天性CMV感染，以减少或预防出生缺陷。

先天性巨细胞病毒(CMV)感染是美国出生缺陷的主要原因。尽管有几次尝试，到目前为止，还没有被批准预防CMV先天性传播的疫苗。我们认为，除了糖蛋白B，或gb蛋白抗原，成功的CMV疫苗将需要包括五聚体，一种5蛋白膜结合抗原复合物所需的上皮，内皮和髓系细胞感染的病毒。含有五聚体作为重组蛋白或复制缺陷病毒的CMV疫苗的制备和规模都很复杂。我们利用我们的平台制造了一种mRNA疫苗，该疫苗的目的是使五聚体形成其天然的膜结合构象。本研究药物旨在预防或控制CMV感染，包括五聚体编码的5种mRNA，以及先前已证明部分临床疗效的CMV GB的一种mRNA。第一阶段的mRNA-1647试验产生了安全性和耐受性数据，并证明了免疫原性.截至2019年9月，来自第一阶段试验的临时数据表明，该疫苗总体上具有良好的耐受性。没有疫苗相关的严重不良反应。最常见的局部不良反应，或称AR，是注射部位疼痛。最常见的系统性动脉粥样硬化是头痛、疲劳、肌痛和寒战。CMV阴性者在第三次接种后的7个月内，30、90和180克剂量水平的中和抗体滴度与剂量有关。根据第一阶段试验的中期数据，我们在美国启动了mRNA-1647的第二阶段试验。

CMV(mRNA-1647)：疾病概况

CMV是出生缺陷的主要原因，没有经过批准的疫苗。

人巨细胞病毒(CMV)是人类常见的病原体，也是疱疹病毒家族的成员。血清呈阳性反应，显示出以前接触过病毒，随着年龄的增长，在美国育龄妇女中约为40-60%。然而，对CMV的普遍认识并不高。只有不到10-20%的成年人知道CMV，大多数健康成人在初次(初级)CMV感染后没有症状。然而，在工业化国家，每年约有0.6%至0.7%的新生儿自然感染CMV。先天性巨细胞病毒是由受感染的母亲将病毒传染给未出生的婴儿造成的，这是造成出生缺陷的主要原因，美国每年约有25 000名新生儿感染。大约20%的受感染婴儿出生缺陷，包括永久性神经发育障碍，包括听力丧失(通常是永久性的)、视力障碍、不同程度的学习障碍、肌肉力量和协调能力下降，甚至死亡。一些研究报告说，大约三分之一患有严重先天性疾病的婴儿将在出生后的第一年内死亡，幸存者、他们的照顾者和卫生系统承受着重大的长期负担。

目前还没有可用于CMV的疫苗，以前开发疫苗以减少或防止先天性传播的许多尝试都缺少了一种关键抗原--五聚体。我们认为五聚体对病毒感染上皮细胞、内皮细胞和髓系细胞至关重要。我们认为，由于作为多单位抗原复合物生产的复杂性，在某些先前的重组蛋白疫苗尝试中没有将该五聚体包括在内。先前的疫苗研究表明，对CMV感染的效力不足，免疫反应的持久性有限。一种能使育龄妇女获得持久免疫的疫苗将解决预防先天性巨细胞病毒感染方面一个关键的未得到满足的需要。

CMV疫苗(mR-1647)：我们的产品理念

我们正在研制一种含有复杂抗原的单一疫苗，以预防或控制感染。

我们产生多抗原疫苗的能力使我们能够将传统的靶抗原(GB)与五聚体结合起来，从而使免疫系统专门集中在这些重要抗原上。我们相信这给了我们更大的潜力产生中和抗体，可以阻止CMV从母亲到胎儿的传播。我们阻止传输的方法可以是：

与基于蛋白质的减毒疫苗或减毒活疫苗不同，我们的mrna指令细胞专门制造具有类似病毒呈现给免疫系统的结构的预定抗原，从而使免疫系统集中在这些重要的抗原上。

mRNA-1647由6个mRNAs组成，它们编码专有LNP中已知的难以制造的CMV抗原：

我们提出的CMV方法如下图所示。

CMV疫苗(mR-1647)：临床前信息

我们已经公布了CMV疫苗的临床前数据。

我们已经证明了五聚体和gbmRNAs能够诱导出针对小鼠和非人类灵长类动物抗原的有效和持久的抗体滴度，并于2018年在“疫苗”上发表了这些结果。在一项研究中，小鼠被我们的专利LNP包裹的五聚体和gb mRNA免疫。在接种后的特定时间点取小鼠血清样本。免疫后中和效价的测定方法是将每个样本与CMV病毒混合，将该混合物孵育于人原代上皮细胞培养中，并计数感染细胞的数量。在实验中，我们使用了经批准的用于预防移植患者CMV的药物CytoGam作为对照。巨细胞病毒(CytoGam)是CMV血清学阳性供者混合血浆中的巨细胞病毒免疫球蛋白。下表显示了上皮细胞中的中和抗体滴度，以提高小鼠的疫苗剂量，证明了我们产生中和抗体的能力。我们还观察到，在最高剂量时，我们的mrna疫苗在估计的临床水平上比CytoGam高出75倍以上。此外，我们还观察到，五聚体和gb mRNA可以诱导强烈的T细胞反应。

提高CMVmRNA疫苗剂量的人原代上皮细胞中和效价的小鼠研究

CMV疫苗(mR-1647)：临床资料

在我们的第一阶段试验中，我们已经证明了安全性和耐受性，并产生了免疫原性数据；基于中期第一阶段的数据，我们启动了一项带有mrna-1647的第二阶段

我们公布了mR-1647第一阶段临床试验第二次中期分析的阳性数据，该试验已完成登记，并正在评估181名健康成人志愿者的mR-1647的安全性和免疫原性。临床试验人群包括对CMV感染天真的人群(“CMV-血清阴性”)和以前曾感染过CMV的人。

CMV(“CMV-血清阳性”)。受试者被随机分为安慰剂组、30、90、180或300克mRNA-1647组，给药时间分别为0、2和6个月。第二项计划中的临时分析评估了前三个剂量水平(30、90和180克)在7个月(第三次接种后的一个月)和最高剂量水平(300克)在3个月(第二次接种后的一个月)的安全性和免疫原性。用上皮细胞和成纤维细胞检测中和抗体滴度(阻断感染的循环抗体水平)，分别测定对五聚体和GB疫苗抗原的免疫反应。第二次和第三次接种后，在30、90和180克剂量水平的CMV阴性参与者中，采用ELISpot法测定GB抗原特异性T细胞反应。五聚体特异性T细胞检测仍在发展中。将CMV-血清阴性组疫苗诱导的中和抗体反应与CMV-血清阳性组的基线中和抗体效价进行比较，注意到先前的母体CMV感染与先天性CMV感染的风险比母亲初级CMV感染的风险低约30倍。

在CMV-血清阴性参与者在第三次接种后7个月(第三次接种后一个月)30、90和180克剂量水平：

在上皮细胞和成纤维细胞检测中，中和抗体滴度与剂量有关。

第三次接种后，90和180 g剂量水平的中和抗体滴度比CMV阳性基线滴度在90和180 g剂量水平上高出10倍以上。

第三次接种后，抗成纤维细胞感染的中和抗体滴度比CMV阳性基线滴度在90和180 g剂量水平高1.3~1.4倍。

在CMV-血清阳性参与者在7个月(第三次接种后一个月)的30、90和180克剂量水平：

在上皮细胞和成纤维细胞检测中，中和抗体滴度与剂量有关。

第三种疫苗使抗上皮细胞感染的中和抗体效价在所有剂量水平上比基线效价高出22至40倍。

第三种疫苗使抗成纤维细胞感染的中和抗体效价在所有剂量水平上比基线效价高出大约4至6倍。

CMV阴性组和CMV阳性组中抗上皮细胞感染中和抗体和抗成纤维细胞感染抗体持续呈剂量依赖性增加，300 g mRNA-1647组的安全性和耐受性与180 g剂量组相当。在30、90和180克剂量水平的CMV阴性参与者的子集中，在第二次和第三次接种后的所有剂量水平上都观察到了GB抗原特异性T细胞的激活。

一项安全分析表明，这种疫苗一般是耐受性好的.没有疫苗相关的严重不良反应。最常见的局部不良反应，或称AR，是注射部位疼痛。最常见的系统性动脉粥样硬化是头痛、疲劳、肌痛和寒战。0-55%的CMV-血清阴性治疗组和8-67%的CMV-血清阳性治疗组报告发热.一般来说，与第二次接种相比，第三次疫苗接种后系统性ARs的发生频率较低，与CMV-血清阴性组相比，CMV-血清阳性组中更常见。在CMV阳性者中，3级ARs更常见，表现为疲劳(给定剂量组的0-27%)、寒战(给定剂量组的0-27%)和发烧(给定剂量组的0-33%)。正如在上一次中期分析中所报告的那样，有一个4级AR的孤立实验室发现部分凝血活酶时间升高，在基线(一级)升高，并在下一个实验室测试自我解决，没有相关的临床发现。300 g剂量水平的安全性和耐受性数据与180μg剂量水平观察到的数据基本相似。

虽然小样本限制了从数据中得出的结论，但这一临时分析的结果建立在第二次免疫接种后一个月的安全和免疫原性数据的基础上，即30、90和180克剂量水平。一份为期12个月的安全和免疫原性临时分析报告将在第三次疫苗接种后6个月内报告安全性和免疫原性结果。

第二阶段开始和第三阶段规划

mR-1647是第一个进入第二阶段研究的传染病mrna疫苗.这项随机、观察盲、安慰剂对照、剂量确认阶段的研究将在美国约252名健康的CMV阴性和CMV阳性成人志愿者中研究mR-1647的安全性和免疫原性。参与者被随机分为安慰剂或50，100或150 gmRNA-1647，给药时间分别为0，2和6个月。这项第二阶段的研究正在测试预期的第三阶段配方，其中包含相同的脂质纳米粒子(“LNP”)用于第一阶段的研究。第一次中期分析将在三个月(第二次接种后一个月)评估安全性和免疫原性，目的是为第三阶段的剂量选择提供信息。

我们正在积极准备一项全球随机、观察者盲、安慰剂控制的第三阶段关键研究，以评估mrna-1647对育龄妇女原发性CMV感染的疗效。我们已征求并收到了C型会议反馈。

来自美国食品药品监督管理局(FDA)的初步设计的关键试验。我们认为，可以通过不超过8，000名参与者的试验来实现这一目标，北美和欧洲已开始对研究地点进行可行性评估。关键的试验设计将在与FDA和其他全球卫生当局讨论后最后确定。我们预计在2021年开始进行关键的第三阶段研究，目前正在进行制造和规划工作。更多的批量一致性和青少年桥接临床试验正在计划中。

hMPV/PIV 3疫苗(mR-1653)概述

我们正在研制一种疫苗，以对付两种导致呼吸道感染的病毒。

人偏肺病毒(HMPV)和人副流感病毒3(PIV 3)是儿童呼吸道感染的重要原因。尽管hMPV和PIV 3对人类健康有重大影响，但相对于RSV而言，对这些病毒的关注和研究却相对滞后。迄今为止，尚无预防hMPV或PIV 3感染的疫苗获得批准。我们的平台允许我们将编码两种病原体抗原的mRNAs结合在一种联合疫苗中，从而使单一疫苗能够预防两种呼吸道感染。在我们的方法中，我们利用编码膜融合糖蛋白(F)的mRNA序列，或F蛋白，为每种病毒。我们已经产生了安全性，耐受性和免疫原性的数据，从第一阶段试验的mRNA-1653在美国已经完成。基于这些数据，我们在美国正在对12-36个月的健康成人和儿童进行第1b阶段的mRNA-1653试验。

hMPV/PIV 3疫苗(mR-1653)：疾病概况

hmpv和pIV 3对人类健康有重大影响，但相对于RSV的研究和关注却相对滞后。

虽然这种RNA病毒是上呼吸道和下呼吸道感染最常见的原因之一，但目前还没有批准的hMPV疫苗。4%至15%的急性呼吸道感染患者检测到hMPV。hMPV主要在幼儿中引起疾病，但也可以感染成人、老年人和免疫缺陷患者。感染的临床症状从轻度上呼吸道感染到危及生命的严重毛细支气管炎和肺炎。hMPV于2001年被发现，并被确定为呼吸道感染的主要原因。

目前尚无PIV 3疫苗，尽管这种RNA病毒被认为是儿童呼吸道感染的重要原因。来自副流感病毒(PIV)的感染占5岁以下儿童急性呼吸道感染的7%。在确定的四种PIV类型中，PIV 3最常见的是感染，与其他三种PIV类型相比，导致下呼吸道感染更为严重。虽然PIV 3相关感染在过去已经被确认，但在过去几年中，人们对PIV 3对患者和医院的负担的认识有所提高。

大多数hMPV或PIV 3相关住院儿童发生在2岁以下。尽管hMPV和PIV 3对人类健康有重大影响，但相对于RSV而言，对这些病毒的关注和研究却相对滞后。人们对hMPV或PIV 3感染住院的认识有所提高，我们认为，为婴儿和学步儿童进行抗hMPV和PIV 3的主动免疫的单一疫苗将是有价值的。以前开发疫苗的尝试只集中在hMPV或PIV上，没有已知的联合疫苗尝试。

hmpv/pv 3疫苗(mR-1653)：我们的产品理念

我们的方法是为所有婴儿和蹒跚学步的儿童研制一种联合疫苗。

mR-1653是一种单一的研究疫苗，由两个不同的mRNA序列组成，它们编码hMPV和PIV 3的膜F蛋白，在我们的专有LNP中共同表达，如下图所示。

hMPV/PIV 3疫苗(mR-1653)：临床前信息

我们的mrna疫苗在多种物种中具有免疫原性。

我们评估了hMPV/PIV 3 mRNA疫苗在小鼠、Sprague Dawley大鼠、棉花大鼠和非洲绿猴(AGM)中编码hMPV和PIV 3病毒全长F蛋白的多种组合，每一种疫苗都在肌肉内注射或注射IM。这些研究表明，编码这些病毒F蛋白的mRNA在所有被测物种中都能诱导出稳健的中和抗体滴度。例如，编码hMPV和PIV 3基因mRNA的中和抗体滴度如下图所示。C57BL/6小鼠在研究第1、29天分别用0.33、2或12μg的制剂肌肉注射免疫C57BL/6小鼠。第43天测定血清中和抗体滴度。结果以每组7只小鼠的几何平均滴度(GMT)表示。在下图中，我们用hMPV(左面板)和PIV 3(右面板)免疫小鼠后，用hMPV和PIV 3的mRNA免疫小鼠，并给出了检测的下限(LLOQ)。

中和抗体被认为是重要的保护hMPV和PIV 3。hMPV或PIV 3自然感染诱导的中和抗体滴度可作为临床前模型和临床试验中hMPV/PIV 3疫苗诱导抗体效价的基准。我们测定了15例血清阳性成人供体的几何平均中和抗体滴度，hMPV为3，807(499~20，751)，PIV 3为263(47~>1024)。我们的hMPV/PIV 3 mRNA疫苗在进行两次剂量水平的评估后，在小鼠体内产生了类似的中和抗体滴度，如上图所示，我们相信它具有在人类中具有保护作用的潜力。

我们已经证明，我们的hMPV和PIV3mRNA联合疫苗不会导致疫苗增强的呼吸道疾病(在棉花大鼠中进行评估)，并且对hMPV或PIV 3病毒攻击有保护作用(在棉花大鼠和AGM中进行评估)。

hMPV/PIV 3疫苗(mR-1653)：临床资料

我们已经从美国完成的第一阶段试验中获得了安全性、耐受性和免疫原性数据；根据这些数据，我们在美国正在对12至36个月的健康成人和儿童进行1b试验。

mR-1653第一阶段研究是一项盲、随机、观察者盲、安慰剂对照、剂量范围为人类首例的研究，目的是评估mR-1653在美国健康成人中的安全性和耐受性、反应性和免疫原性。这项研究评估四个剂量水平的mRNA-1653(25，75，150和300克)肌肉注射在第一天和第一个月，一个月的免疫随机为mRNA-1653或安慰剂在研究的剂量选择阶段。

这项研究的主要目标包括评价：

研究的关键终点是mRNA-1653的安全性和耐受性。

试验原理图见下图。在剂量上升阶段，有顺序的登记进入四个剂量水平的mRNA-1653或安慰剂。经过内部安全审查后，允许进入下一个剂量水平。在剂量上升阶段，5名受试者被随机分配为4：1的比例接受mR-1653或安慰剂。安全监测委员会，或SMC，审查了安全数据后，剂量上升登记完成，以允许登记进入剂量选择阶段的三个最高剂量水平和可接受的安全配置。此外，SMC在剂量选择阶段定期审查安全数据.

124名受试者参加了这项研究，受试者同时服用了这两种剂量。在SMC对剂量上升阶段的安全数据进行非盲评估的基础上，在剂量选择阶段对三个最高剂量水平(75、150和300μg)进行了评估。这项研究已经完成。

第一阶段试验的中期数据显示，单次接种mRNA-1653可提高血清抗hMPV和PIV 3的中和效价，而且在所有剂量水平上，增强的幅度是相似的。与先前接触hMPV和PIV 3的情况一致，所有研究参与者在基线时都有中和两种病毒的抗体。单次mrna-1653疫苗接种一个月后，hmpv中和效价约为基线的6倍，pv 3中和效价为基线的6倍。

大约比基线大三倍(基于几何平均比率)。第二个mRNA-1653疫苗接种一个月后，第一次接种没有进一步提高抗体滴度。此外，中期数据显示hMPV和PIV 3血清中和抗体滴度在7个月内仍保持在基线以上。mRNA-1653被认为是耐受性良好的。没有关于SAE、特别感兴趣的不良事件或导致退出的不良事件的报告。注射部位疼痛是最常见的AE和最常见的3级AE。

我们正在进行第1b期试验，以评估健康成人和12-36个月儿童的mRNA-1653。第1b阶段试验是一项随机、观察盲、安慰剂对照的剂量范围试验，目的是评估健康成人(18-49岁)和儿童(12-36个月)两种剂量水平的mRNA-1653的安全性和免疫原性，并有先前hMPV和PIV 3暴露的血清学证据。截至2020年2月12日，24名成人随机按1：1：1的比例接受两剂30μg的mR-1653，150μg的mR-1653，或两个月后的安慰剂。

小儿呼吸道合胞病毒疫苗(mR-1345)综述

我们正在研制一种儿童RSV疫苗，我们打算最终将其与hMPV/PIV 3疫苗mRNA-1653结合起来，以解决儿童广泛的病毒性呼吸道疾病。

呼吸道合胞病毒是五岁以下婴幼儿呼吸道疾病最常见的原因之一。这三种病毒与人偏肺病毒(HMPV)和人副流感病毒3(PIV 3)共同构成儿童呼吸道感染的主要原因。到目前为止，还没有一种疫苗可以预防这三种感染。我们的平台允许我们在一种疫苗中结合编码多种抗原的mRNAs，利用编码每种病毒的膜融合(F)糖蛋白(“F蛋白”)的mRNA序列。我们相信，我们可以研制出一种单一的疫苗，可以预防幼儿的所有三种呼吸道感染。我们打算在早期临床发展中独立开发mRNA-1345，并随后结合mRNA-1653对其应用进行评估。

到目前为止，尚无有效的预防RSV疫苗获得批准，唯一获得批准的预防性治疗方法是单克隆抗体(“mAb”)palivizumab，该疫苗在美国作为Synagis在美国销售，用于高危的呼吸道合胞病毒(RSV)感染。儿童RSV疫苗mR-1345正在研制中，用于幼儿主动免疫，以保护他们免受呼吸道合胞病毒相关疾病的侵袭。像我们的RSV发展候选与默克，mRNA-1777和mRNA-1172或默克V 172，儿童RSV疫苗mRNA-1345编码膜锚定版本的稳定预融合F蛋白，主要的目标是有效中和和保护性抗体。与mRNA-1777相比，mR-1345表达增强，免疫原性增强，mRNA-1345的mRNA和蛋白序列与mRNA-1777和mRNA-1172或Merck V 172均有明显差异。儿童RSV疫苗mR-1345是在我们的专利LNP中配制的，目前正由我们单独开发。根据我们与默克公司的合作条款，我们保留将某些mRNA疫苗商业化的权利，以便在12岁以下的人群中预防RSV感染，同时使用hMPV和PIV3疫苗(mR-1653)。

小儿呼吸道合胞病毒疫苗(mR-1345)：疾病概况

RSV是全球婴幼儿严重下呼吸道疾病和住院的主要原因。

呼吸道合胞病毒是呼吸道疾病的常见原因，大多数儿童至少两岁感染一次。病毒主要通过感染分泌物污染环境表面传播，症状通常在暴露后几天内开始。这种疾病可能表现为喘息、毛细支气管炎、肺炎、住院甚至死亡。在美国，估计每年有200多万5岁以下儿童因呼吸道合胞病毒感染而住院治疗。据估计，在全球范围内，RSV造成了约3300万次急性下呼吸道感染，320万例住院，以及每年118，000例5岁以下儿童死亡。RSV感染遵循季节性模式，主要发生在北半球11月至4月之间，主要发生在南半球3月至10月之间。

 

儿童RSV疫苗(mR-1345)：我们的产品理念

用一种改进的RSV抗原和我们的专利LNP配方，在预防其他病毒性呼吸道疾病的联合疫苗的背景下，预防幼儿RSV疾病。

该儿童RSV疫苗mRNA-1345编码一种工程形式的RSV F蛋白稳定在预融合构象中，是由我们的专利LNP。在RSV表面，F蛋白以三聚体的形式存在。F蛋白的预融合构象与宿主细胞膜相互作用，从预融合到融合后的构象变化驱动病毒与宿主细胞融合。大多数RSV特异性中和抗体是针对仅存在于F蛋白预融合构象上的表位的。在动物实验中，F蛋白的预融合状态引起的中和抗体反应优于其他动物的后融合状态。宿主表面预融合F蛋白的原理图

细胞中和抗体所识别的位点如下图所示；图左侧的嵌体显示我们专有的LNP中表达的mRNA的预期设计，与mRNA-1653相同的LNP配方，右边的嵌体显示细胞表面预定的预融合F蛋白。我们相信，由mRNA-1345引起的中和抗体可能会导致一种有效的RSV疫苗在幼儿。

小儿RSV疫苗(mR-1345)：临床前信息

我们用mRNA-1345的mRNA处理F蛋白，用融合前构象指示mAb AM 14测定F蛋白在细胞表面的表达和构象。下图显示，在经mR-1345处理的细胞上检测到F蛋白，其水平高于mR-1777处理的细胞。

 

mrna-1345或mrna-1777诱导培养细胞RSV-F的表达

我们已经证明，儿童RSV疫苗mRNA-1345在小鼠体内可诱导抗RSV中和抗体滴度。例如，下面的左面板显示了一项研究的结果：在研究的第1天和第21天，用不同剂量的mRNA-1345免疫小鼠，并在第33天的血清中测定RSV中和抗体的滴度。与一项类似的小鼠研究结果相比，用mR-1777的mRNA-1777与mRNA-1345相同的专利LNP配制的结果相比，儿童RSV疫苗mRNA-1345的免疫原性明显增强。我们相信我们可以利用

我们身体的非临床，临床和CMC经验，从我们的疫苗组合，以加快我们的儿科RSVmRNA-1345疫苗的临床前发展。

小鼠血清中和效价mrna-1345和mrna-1777 mrna在我们相同的专利lnp中的表达

20世纪60年代对福尔马林灭活的RSV疫苗进行的临床试验表明，接种疫苗的婴儿患严重呼吸道合胞病毒的比率高于对照组，这一发现被称为疫苗增强呼吸道疾病(ERD)。人们认为，核酸疫苗，包括mrna，由于其与活病毒的生物学相似性，其患ERD的风险较低。鉴于儿童RSV疫苗mR-1345的设计是为了使一个人自己的细胞能够在细胞内产生预融合F蛋白，我们认为它很可能会重新描述自然感染所见的抗原性表现和免疫细胞刺激。此外，在棉花大鼠RSV模型中，mRNA-1777 RSV疫苗不具有ERD的易感性。为了进一步证实儿童RSV疫苗mRNA-1345不存在ERD风险，将在RSV阴性儿童或婴儿临床发展前进行进一步的临床前研究。

小儿呼吸道合胞病毒疫苗(mR-1345)的临床应用

我们计划在健康成人中进行第一阶段的剂量范围、安全性和mR-1345免疫原性试验，并在对成人数据进行审查后，继续对RSV-血清阳性儿童进行试验。在评估了这一阶段研究的结果和对年轻的RSV-血清阴性儿童的潜在剂量范围研究之后，我们计划评估mRNA-1345与hMPV/PIV 3疫苗mRNA-1653结合的时间表，以便进一步发展为RSV/hMPV/PIV 3联合疫苗。

EB病毒疫苗(mR-1189)概述

我们的EBV疫苗旨在防止传染性单核细胞增多症和EBV感染。

EBV是包括CMV在内的疱疹病毒家族的一员，成年时感染约90%的人，在美国，初级感染通常发生在儿童和青春期晚期(分别约为50%和89%的血清阳性率)。EBV是美国传染性单核细胞增多症(IM)的主要原因，占美国每年大约120万例IM病例中的90%以上。IM可以使病人衰弱数周至数月，在某些情况下，可能导致住院和脾破裂。EBV感染与某些淋巴增生性疾病、癌症和自身免疫性疾病的发展和进展有关。尤其是，EBV感染和IM与患多发性硬化(MS)的风险增加有关，多发性硬化症是中枢神经系统的一种自身免疫性疾病。目前尚无经批准的EBV疫苗或有效治疗方案。与CMV相似，EBV在其生命周期中有溶解和潜伏阶段，其表面(包膜)含有多种糖蛋白和糖蛋白复合物(gp 350、Gh/gl、Gh/gl、Gh/gl/GP 42和GB)，介导不同细胞类型的病毒进入和感染。EBV gp 350通过与补体受体2(CR2)结合，介导与B细胞的粘附，然后与人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类病毒Gh/gl/GP 42复合物结合。

不同的受体。对于B细胞和上皮细胞的进入，EBVGh/gl复合物与细胞特异性受体的结合会导致gb的激活，进而促进病毒-细胞膜的融合和感染。Gh/gl和gb是所有疱疹病毒保守的核心病毒融合机制。

类似于我们的CMV疫苗(mR-1647)的产品概念，我们利用我们的平台生成了一个包含gp 350、gb、gh、gl和gp 42的5种mRNAs的mrna疫苗，它们在其固有的膜结合构象中表达，以供免疫系统识别。我们观察到，在小鼠和非人类灵长类动物(“NHPs”)中，针对B细胞和上皮细胞感染的抗原特异性抗体的高和持久水平是临床前免疫原性的表现形式。我们打算进行第一阶段的试验，以测试疫苗的安全性和免疫原性，以了解其预防原发感染的潜力，并在阴性成人中预防EBV感染后的IM。

EB病毒：疾病概述

EBV是IM的主要病因(约90%)，并与一系列恶性肿瘤和自身免疫性疾病的发生有关。

EBV是一种常见的疱疹病毒，通过体液传播，最常见的是唾液，主要由幼儿和青少年感染。青少年和年轻人的血清转化率很高，特别是在大学年龄人口(每年约10%至25%)中，20岁时血清感染率约为90%。在初次感染后，病毒在大多数感染者中建立潜伏期，并在这种状态下持续存在。即使在免疫能力强的宿主中，病毒也可以在一段时间内间歇性地重新激活。这种病毒通常会感染口咽或上皮细胞中静止的B细胞，这些细胞排列在身体的粘膜表面，进而感染B细胞。B细胞有系统地传播，并充当潜伏病毒的宿主。在35%至75%的病例中，原发性感染可引起IM，视年龄而定，其特点是需要医生就诊，包括喉咙痛、淋巴结肿大、发烧、身体疼痛和疲劳，往往导致病人和照顾者旷课数月。

目前还没有经过批准的EBV疫苗，但gp 350单独用于降低IM率的潜力已经在临床上得到了证实。由其他人开发的一种实验疫苗，由佐剂重组gp 350蛋白组成，导致78%的参与者在第二阶段的研究中降低了IM的发病率，该研究对181名16-25岁的健康志愿者进行了研究。但组间对无症状EBV感染的防护效果无显着性差异。我们认为Gh/gl和gb的加入具有保护上皮细胞感染的潜力。我们认为gp 350、Gh/gl或gb的免疫应答具有提供B细胞保护的潜力，而GP 42的加入可能会进一步增强B细胞的保护作用。该疫苗通过预防上皮细胞和B细胞感染，不仅可以显著降低IM的发生，而且可以预防EBV感染。

EBV感染与罹患某些癌症和多发性硬化症的风险增加有关。在西方工业化国家，EBV与移植后淋巴增生性疾病的发展以及包括霍奇金淋巴瘤在内的多种癌症有关。此外，在EBV阳性的人群中，传染性单核细胞增多症的发生与患多发性硬化症的相对寿命风险增加2倍以上有关。在东亚，EBV与80%-99%的鼻咽癌相关.在非洲，EBV参与了大约95%的地方性Burkitt淋巴瘤的发展。全世界约有1.5%的癌症死亡是由EBV相关的恶性肿瘤引起的.

 

EBV疫苗(mR-1189)：我们的产品理念

我们正在研制一种多抗原疫苗，旨在防止传染性单核细胞增多症和EBV感染的发展。

类似于我们的CMV疫苗(mRNA-1647)的产品概念，我们认为有效的EBV疫苗必须对大多数敏感细胞类型中病毒进入所需的抗原产生免疫反应。因此，我们设计了EBV疫苗mR-1189，以引起对EBV包膜糖蛋白gp 350以及gb、GP 42和Gh/gl复合物的免疫应答，这是上皮细胞和B细胞感染所必需的。mR-1189包含五个编码病毒蛋白gp 350、gb、GP 42、Gh和gl的mRNA，这些蛋白质被封装在我们的专有LNP中。从我们的mRNA翻译的蛋白质将显示在细胞表面的自然构象，刺激中和抗体的产生。通过训练免疫系统识别和中和感染B细胞和上皮细胞的机制，我们相信我们的疫苗有可能预防EBV原发感染，从而预防IM的发展。此外，从长远来看，如果我们的EBV疫苗获得批准，我们可能会进行营销后和人口研究，以潜在地评估其对其他EBV相关疾病的影响。我们的EBV疫苗使用了与我们的CMV疫苗(mR-1647)相同的专有平台技术，该技术通常具有良好的耐受性，并且显示持久的中和抗体滴度高于在我们的第一阶段试验中跟踪三剂量mR-1647的CMV阳性患者的抗体效价。

EBV疫苗(mR-1189)：临床前信息

我们已经证明了诱导抗EBV抗原抗体的能力，这是病毒进入B细胞和上皮细胞所必需的。

我们给天真的Balb/c小鼠注射了两剂抗EBV抗原的疫苗，大约相隔四周。于第57天测定外周血中与上皮细胞进入(Gh/gl和gb)或B细胞入口(gp 350、gh/gl和gb)有关的病毒蛋白的抗体滴度。结果显示，每组5只动物，与阴性对照组相比，抗原特异性免疫球蛋白G(“IgG”)水平较高。

第57天-疫苗接种后

EBV疫苗(mR-1189)：临床计划

我们正计划进行第一阶段的临床试验，以测试mR-1189在血清阴性成人中的安全性和免疫原性。

我们打算进行第一阶段的试验，以测试疫苗的安全性和免疫原性，以了解其预防原发感染的潜力，并在阴性成人中预防EBV感染后的IM。

预防疫苗：全球卫生方案

我们预防疫苗的全球卫生组合寻求利用我们的mRNA技术来应对流行病和大流行病。目前，我们正与BARDA、DARPA和NIH等战略合作伙伴合作，资助和支持我们在这一领域的项目。这个组合中的第一个项目，H10N8疫苗和H7N9疫苗，帮助识别和克服了mRNA疫苗的技术挑战，并最终可以解决这些病毒的大流行。在12个月内，我们也从mrna序列转向了首次在人体内进行寨卡疫苗的试验。随着我们继续在研究引擎和早期发展引擎中建立基础设施和能力，我们相信我们能够帮助迅速应对未来的大流行病。鉴于目前的资金和优先事项，H10N8流感疫苗(mR-1440)和基孔肯亚疫苗(mR-1388)目前正在被剥夺，这取决于未来的供资情况。关于通过批准为该公司的H7N9流感疫苗计划提供资金的讨论正在进行中。

通过对平台和制造技术的投入，我们建立了在60天内设计和生产小批cGMP疫苗的能力。我们的个性化癌症疫苗(PCV)项目(mR-4157)已经在临床上证明了这一点，我们已经为该项目展示了在病人肿瘤测序后60天内为单个患者制造和释放“定制”疫苗的能力。我们相信，这种能力可以应用于快速生产临床候选mRNA疫苗，供早期临床研究使用。与美国国立卫生研究院(NIH)下属的国家过敏和传染病研究所(NIAID)的疫苗研究中心(VRC)和微生物学和传染病司(DMID)合作，我们正在寻求快速生产一种疫苗，以应对当前的SARS-CoV-2疫情爆发。我们已经充分利用了我们的疫苗知识，在25天内为我们的SARS-CoV-2疫苗设计和制造临床用品。SARS-CoV-2于2020年1月7日在中国武汉首次发现.

SARS-CoV-2疫苗(mR-1273)概述

与NIH和CEPI合作，我们正在迅速开发一种疫苗，以应对SARS-CoV-2疫情。

在NIH和CEPI的合作下，我们正在应用我们的快速疫苗设计和制造平台来生产针对SARS-CoV-2病毒的疫苗，以应对目前正在出现的SARS-CoV-2的爆发。SARS-CoV-2是一种新的冠状病毒，自2020年1月7日鉴定以来，已经感染了数千人，并扩散到多个大陆。与VRC合作，我们正在开发一种基于mRNA的疫苗，根据SARS-CoV-2的基因组序列，设计了一种表达冠状病毒SPIke(S)蛋白的疫苗。在2020年1月13日，国家卫生研究院和我们的传染病研究小组确定了SARS-CoV-2疫苗的序列，并动员我们进行临床生产。截至2020年2月24日，第一批临床材料已运往美国国立卫生研究院，用于计划在美国进行的第一阶段临床试验。

SARS-CoV-2：疾病概述

SARS-CoV-2是一种新的冠状病毒，由动物到人和人与人之间的传播已经从中国迅速传播到多个大陆。

冠状病毒是一类可导致呼吸道疾病的病毒，包括中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)。冠状病毒在动物和人之间传播，可以进化成以前在人类中没有发现的毒株。2020年1月7日，中国武汉市发现SARS-CoV-2是肺炎的病因，越来越多的国家发现了更多的肺炎病例。

据世界卫生组织估计，截至2020年2月19日，至少有25个国家有75 000例确诊病例，全世界有2 000多人死亡。疑似感染人数可能会大大增加。值得注意的是，目前还没有对无症状感染率有很好的了解。目前，还没有针对SARS-CoV-2的批准疫苗.

sars-cov-2疫苗(mrna-1273)：我们的产品理念

我们正在研制一种抗SPIK蛋白复合物的疫苗，以防止SARS-CoV-2感染.

在VRC的合作下，我们选择了病毒尖峰蛋白作为SARS-CoV-2疫苗(mR-1273)的抗原。我们的疫苗包括编码斯派克蛋白的mRNA，我们相信它将在细胞表面形成一个同三聚体复合物，就像在冠状病毒颗粒表面表达时那样。SPIKE蛋白复合物是膜融合和宿主细胞感染所必需的，已成为抗MERS和SARS冠状病毒的实验疫苗的靶点。我们正在利用我们的制造平台来迅速应对当前的公共卫生危机。

sars-cov-2疫苗(mrna-1273)：具有代表性的关于相关冠状病毒mers的临床前信息。

我们已经证明了诱导中和抗体的能力，这种抗体可以通过一种相关的冠状病毒MERS来保护病毒免受病毒攻击。

我们已经开始在动物模型中评估我们的SARS-CoV-2疫苗的构建，并将在短期内对临床批量进行进一步的测试。在与VRC合作开发MERS疫苗的过程中，我们设计了一种基于mRNA的疫苗，该疫苗针对的是预融合稳定的Spike蛋白。

在评估潜在的MERS疫苗免疫原性的临床前研究中，给家兔注射一剂或两剂疫苗(一剂加第21天的助推器)，然后在第42天注射MERS病毒。第46天，通过支气管肺泡灌洗(BAL)测定喉、鼻组织MERS病毒载量。我们观察到了中和抗体的诱导，这些抗体足以影响鼻子中的病毒滴度降低约3对数，从BAL检测到的病毒滴度降低约4对数。喉部的病毒滴度降低到检测的下限。

 

H10N8疫苗(mRNA-1440)和H7N9疫苗(mRNA-1851)概述

我们的h10n8和h7n9研究疫苗展示了我们的平台在应对流感大流行方面的潜力。

流感是最易发生和最致命的传染病之一，仅在美国每年就有12，000至56，000人死亡。在循环的季节性流感病毒株中的抗原变化很小，这被称为抗原漂移，从一年到下一年，需要改变疫苗来匹配新的毒株。潜在的大流行性流感病毒株可以很快地从抗原的实质性变化中产生，这被称为抗原转移，而且由于在某些人群中不存在预先存在的免疫，它们可能是致病性的。应对潜在的大流行病需要迅速生产有效疫苗的能力。我们认为，我们的平台使安全和有效的疫苗能够迅速发展。作为概念的证明，我们研制了H10N8和H7N9禽流感毒株的疫苗，在这些疫苗中存在保护人类的数量相关性(血凝素抑制，或HAI，滴度>1：40)。我们观察了H10N8和H7N9两种mRNA疫苗在第一阶段临床试验中的耐受性和免疫原性，并在2017年发表了H10N8的临床前和中期临床数据，并于2019年在疫苗中公布了H10N8和H7N9的第一阶段结果。我们不打算通过我们自己的临床开发来推进这些项目。我们可以在政府或其他赠款的资助下推进这些项目。

H10N8疫苗(mRNA-1440)和H7N9疫苗(mRNA-1851)：疾病概况

传统疫苗很难对新的流感大流行作出反应。

甲型流感病毒是一种RNA病毒，基因组分为八个单独的基因片段，编码至少11个功能性蛋白质，用于感染、复制和逃避宿主的抗病毒反应。病毒表面表达的两种主要糖蛋白是血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)，它们都是感染的关键。HA通过与宿主细胞表面含有唾液酸的受体结合而介导病毒进入宿主细胞，并导致病毒与宿主内胚层膜的融合。NA在感染后期介导病毒受体的酶切，允许释放后代病毒。

甲型流感病毒感染多种物种，包括鸟类、猪、海洋哺乳动物和人类。野生水生鸟类是感染鸟类和哺乳动物的甲型流感病毒的宿主。虽然这些病毒在鸟类中很多是非致病性的，而且大多数不会感染人类，但近几十年来，一些禽流感病毒，如H10N8和H7N9，已经跨越物种障碍，导致人类疾病。

由于H7N9，已经发生了五次人类感染流行病，总数超过1 500例，死亡率为34%-47%。到目前为止，已报告了三例H10N8病例，其中两例死亡。对于H10N8和H7N9，严重或致命感染的特点是在最初症状出现后几天内迅速发展为呼吸衰竭。

目前正在努力研制H7N9疫苗和覆盖H10N8的通用流感疫苗。然而，我们认为，使用传统方法生产这些疫苗可能导致疫苗的几个缺点。这些措施包括：

H10N8疫苗(mRNA-1440)和H7N9疫苗(mRNA-1851)：我们的产品概念

本平台可将ha抗原基因的mrna快速应用于临床检测。

我们的H10N8和H7N9流感疫苗项目都是基于遗留LNP中细胞病毒HA膜蛋白的mRNA序列。mRNA-1440编码H10N8株的HA蛋白，mRNA-1851编码H7N9株的HA蛋白。

我们认为，mRNA技术为传统的疫苗生产方法提供了几个优势，包括：

H10N8疫苗(mRNA-1440)和H7N9疫苗(mRNA-1851)：临床前信息

我们观察了我们的mrna h10n8疫苗在多种物种中的免疫原性。

传统上，疫苗对流感感染的保护水平是用HAI试验来衡量的。欧洲药品管理局(EMA)和美国食品和药物管理局(FDA)已批准HAI效价>1：40，以表明抗体水平被认为对感染有50%的保护作用。这一基准依据的是灭活疫苗的数据，并随着年龄组和环境的不同而不同。

从H10N8编码HA蛋白的mRNA疫苗的概念证明已在小鼠研究中证明。一次接种H10N8疫苗后，小鼠产生的抗体足以达到1：40以上的HAI效价，这被认为是预防流感的定量相关因素。我们在2017年的“分子治疗”杂志上也发表了支持H10N8疫苗的雪貂和半食蟹猴的免疫原性数据。

我们还观察了我们的mrna h7n9疫苗在多种物种中的免疫原性。

从H7N9流感病毒中提取HA蛋白的mRNA疫苗的概念证明已在小鼠研究中得到证实。用mRNA疫苗接种后，小鼠产生的抗体足以达到>1：40的HA抑制滴度。此外，一剂H7N9疫苗即使在免疫完成后84天也能保护100%的小鼠免受H7N9病毒的致命攻击。在一项雪貂研究中，H7N9疫苗通过皮内注射，减少了

免疫后7天，观察雪貂的肺病毒滴度。我们在2017年的“分子疗法”中也报道了证实猴免疫原性的数据。

H10N8疫苗(mRNA-1440)和H7N9疫苗(mRNA-1851)：临床资料

德国H10N8的第一阶段临床试验已经完成，我们获得了安全性和耐受性数据，并证明了免疫原性。

我们于2019年在疫苗中报告了H10N8疫苗第一阶段试验的结果。该试验达到了描述mR-1440与安慰剂的安全性和耐受性的目的，包括捕获主动和主动的局部和系统性不良事件。H10N8疫苗的第一阶段试验也显示了免疫原性，我们观察到100%的试验对象在第43天(第二次接种后21天)血凝素滴度>1：40，而HAI>1：40被认为是预防流感的定量相关因素。我们相信，如果我们选择使用额外的政府或其他资金，这些数据将为推进该项目的临床发展提供支持。在这个随机，双盲，安慰剂对照，剂量范围的研究中，我们评估了注射剂量25，50，75，100和400克的安全性和免疫原性，并在第1天和第21天进行了两次接种计划。我们还在第1天和第21天的两次接种计划中评估了25和50克的皮肤内或ID剂量水平。本研究的目的是安全性、耐受性和免疫原性进行HAI和微量化(MN)试验。201名受试者参加了这项研究，其中145人接种了IM疫苗，56人接种了ID疫苗。免疫组145人中，25、50、75、100和400μg剂量组分别为30、30、24、23和3人。35名受试者接受了安慰剂治疗。第一阶段的试验是按照我们的传统命名惯例，以Val-506440的名义进行的。此后，我们改变了命名惯例，采用mR-1440取代Val-506440.

在第1阶段试验中，剂量高达100微微克的IM显示出免疫原性。75μg组的启动时间较晚，我们选择不继续完成，因为产生的安全性、耐受性和免疫原性数据支持了100克剂量的进一步发展。皮肤内接种与较高的不良反应(主要是注射部位反应)的发生率有关，我们选择停止ID队列的登记。

在第43天接受H10N8疫苗剂量为25、50和100克的参与者中，几何平均滴度(GMT)如下图A所示。同样，对于这些剂量，34.5%、55.2%和100%的参与者在第43天达到HAI滴度>1：40，如下图B面板所示。

H10N8疫苗(mR-1440)第一阶段临床试验

小组(A)

甲型肝炎指数>1：40的患者在第43天使用h10n8疫苗(mrna-1440)在第1阶段临床试验中所占百分比

小组(B)

100μg剂量的血清转化率为100%。对于该剂量，我们观察到HAI滴度在第二次剂量后6个月内持续存在，HAI几何平均滴度为13.9，95.6%的参与者仍为血清阳性(HAI效价>1：10)，如下图所示。

H10N8疫苗(mR-1440)在100μg剂量下在临床试验中的持续存在

总体而言，100 g IM剂量时，mRNA-1440耐受性良好.下表提供了所请求的不良事件的详细清单。在400克IM剂量组中，有2/3的参与者在第一次接种后24小时内出现严重的不良反应(红斑、头痛)。这些事件符合预先规定的研究暂停规则，在安全委员会审查后，在这个剂量水平的进一步疫苗接种被停止。这些事件在不需要医疗干预或药物的情况下自然得到解决。

报告了3例严重的非请求性AEs(分别为背痛、扁桃体炎和卵巢囊肿破裂)和2例严重的AES(分别为胆囊炎和卵巢囊肿破裂)，认为与mRNA-1440无关。在IM组中报告了124份未经请求的AEs。最常见的上呼吸道感染、背痛、咽炎和口咽痛。没有特别感兴趣的不良事件，或AESIS，或新的慢性疾病的病例。

H10N8疫苗在每次注射疫苗后7天内第1天和第22天内引起各种剂量的不良反应^* 

美国H7N9疫苗的第一阶段临床试验已经结束，我们获得了安全性和耐受性数据，并证明了免疫原性。

我们于2019年在疫苗中报告了H7N9疫苗第一阶段试验的结果。这项试验已经达到了评估mR-1851与安慰剂的安全性和耐受性的目标，包括捕捉被请求的和非请求的局部和系统性不良事件。H7N9疫苗的第一阶段试验也显示了免疫原性，我们观察到96%的试验对象在第43天(第二次接种后21天)显示HAI效价>1：40，其中HAI>1：40被认为是预防流感的定量措施。我们相信，如果我们选择使用额外的政府或其他资金，这些数据将为推进该项目的临床发展提供支持。这一随机、双盲、安慰剂对照、剂量范围广泛的研究使用两个接种计划(第1天、第22天和第1天，第6个月)评估肌肉注射剂量水平，或称IM，剂量水平为10、25和50g。HAI和MN试验的目的是安全性、耐受性和免疫原性。156名受试者参加了这项研究。每组30人在第1天和第22天分别接受10克、25克和50克两种剂量。每组10人在第一天接受10、25和50克的剂量，其中9人在6个月时接受第二次剂量(数据未显示)。36名受试者接受了安慰剂治疗。共有10名受试者退出了这项研究。第一阶段的试验是按照我们的传统命名惯例，以Val-339851的名义进行的。自那以后，我们改变了我们的命名惯例，并采用mR-1851取代了Val-339851.

在这一阶段的临床试验中，给在第1天和第22天接种疫苗的患者注射的剂量可达50微克，临床试验显示了免疫原性。

在第1天和第22天接受10、25和50克剂量注射的参与者的几何平均滴度如下图A所示。另外，对于这些剂量，36.0%，96.3%和89.7%的参与者在第43天达到HAI滴度>1：40，如下图B面板所示。

H7N9疫苗(mR-1851)第一阶段临床试验

小组(A)

H7N9疫苗(mrna-1851)在第1阶段临床试验中hai>1：40的患者中，第43天的患者中所占的百分比。

小组(B)

25g剂量组血清转化率达96%。对于这个剂量，我们观察到第二个剂量后6个月HAI滴度的持久性。海GMT下降，但仍高于HAI滴度10，如下图所示。此外，52%的参与者在6个月时仍呈血清阳性(HAI滴度>1：10)。

H7N9疫苗(mR-1851)25μg剂量抗海抗体在临床试验中的持续存在

总的来说，50g剂量的m RNA-1851具有良好的耐受性.下表提供了被征集的企业的详细清单。大多数可能和可能相关的未被请求的AES是>二级实验室异常，并且在疫苗组和安慰剂组中以相似的比率发生。4种可能与疫苗接种有关的未经请求的严重AEs：2例丙氨酸转氨酶升高(1例50克，1例安慰剂)，1例天冬氨酸转氨酶升高(50克)，1例血小板减少症(安慰剂)。所有病例均无症状，未予干预而得到解决。报告了五种SAE(分别为意外火器相关死亡、睾丸癌、胰腺炎、面部蜂窝组织炎和高血压加重)，并被认为与mRNA-1851无关。在IM组中报告了124份未经请求的AEs。最常见的上呼吸道感染、背痛、咽炎和口咽痛。没有关于急性呼吸道感染或新的慢性疾病发病病例的报告。

H7N9在每次注射疫苗后7天内第1天和第22天内引起的所有剂量水平的不良反应^* 

*数据代表n，%与被索取的AE(%与严重的被索取的AE)

寨卡疫苗(mR-1893)：摘要

与barda合作，我们推出了第二代寨卡疫苗候选疫苗至第一阶段。

寨卡病毒是由寨卡病毒引起的一种传染病，怀孕期间的感染与先天性感染婴儿的严重脑损伤和成人的吉兰-巴雷综合征有关。迄今为止，尚无预防寨卡病毒感染的疫苗获得批准。2016年9月，我们与BARDA签订了一项合同，用于开发寨卡mrna疫苗的费用最高可达1.25亿美元。为了快速应对一种潜在的流行病，我们研制了一种寨卡疫苗，mR-1325，从mrna序列设计到12个月内首次人体临床试验。此外，我们还开发了第二个寨卡疫苗，mRNA-1893年。在剂量的1/20时，mRNA-1893在非人类灵长类动物中表现出了比mRNA-1325更好的保护作用。mRNA-1893年正在美国进行第一阶段的试验.截至2020年2月12日，我们已在第一阶段试验中招收了90名受试者。

寨卡疫苗(mRNA-1893)：疾病概况

我们在2015年面临寨卡病毒的流行，没有疫苗或治疗方法。

寨卡病毒是黄病毒科单链RNA病毒。1947年，它在乌干达兹卡森林的一只恒河猴中首次分离，1952年记录了第一例人类病例。血清流行病学数据表明，它在非洲和亚洲发现伊蚊媒介的地区流行。寨卡病毒主要由伊蚊属的蚊子传播，但它也可以通过先天传播、性传播和献血传播。

2007年，寨卡病毒在整个太平洋岛屿爆发。它于2015年抵达巴西，疫情在美洲蔓延。这导致世界卫生组织(WHO)在2016年宣布其为国际关注的公共卫生紧急事件。在本报告所述期间，婴儿报告了数以万计的小头畸形和先天性寨卡综合征病例，并报告了由此产生的神经后遗症，如成年人报告的吉兰-巴雷综合征。

在成人中，寨卡病毒感染通常是无症状或轻微的，导致发烧、皮疹和结膜炎。然而，孕妇在怀孕期间的感染会导致新生儿出现毁灭性的小头畸形。小头畸形是一种出生缺陷，其特征是头部和大脑异常小，与终身神经发育迟缓、癫痫、智力残疾、平衡有关。

问题，侏儒症/矮小，导致严重残疾，需要终生支持。迄今为止，拉丁美洲已正式报告了100多万寨卡病例。由于大部分病例都是无症状的，我们相信实际病例数可能要高得多。国际旅行意味着寨卡病毒感染有可能具有全球意义。虽然过去几年的病例有所减少，但目前没有任何治疗或疫苗可用于预防和应对未来可能出现的流行病。

目前，没有经批准的寨卡疫苗。设计和合成符合标准的蛋白抗原疫苗、减毒或载体活病毒疫苗或灭活疫苗是一项耗费时间和挑战性的工作。因此，这些传统的疫苗方法发现很难对新出现的寨卡病毒疫情作出足够快的反应。

寨卡疫苗(mR-1893)：我们的产品理念

我们在12个月内将一种复合抗原推向临床，并进行了下一代疫苗的随访。

我们相信，与传统疫苗相比，我们的平台可以更快地开发具有复杂免疫抗原的mRNA疫苗。为了快速部署寨卡病毒的mRNA疫苗，我们利用现有的序列和遗留的LNP来开发mR-1325。mR-1325包含一个编码寨卡病毒结构蛋白的序列.设计的目的是翻译一种多聚蛋白，并在细胞内进行处理，形成一个分泌的类似病毒的粒子，即vlp。这个过程模拟了自然感染后细胞的反应，如下图所示。

继续努力识别免疫原性增强的不同mRNA序列导致了mRNA-1893，这一不同于mRNA-1325的序列增加了寨卡病毒VLPs的产生，并在临床前动物模型中与mRNA-1325相比产生了更强的免疫原性和保护作用。mRNA-1893也是在我们的专利LNP中制定的.

寨卡疫苗(mRNA-1893)：临床前信息

我们观察并公布了寨卡疫苗的免疫原性数据。

mRNA-1325和mRNA-1893的mRNA序列已经在小鼠和非人类灵长类动物或非人类灵长类动物(NHPs)中进行了测试。我们在2017年的“细胞”杂志上发表了这些数据的一部分。与NHPs剂量的1/20相比，mRNA-1893的mRNA序列具有同等的免疫原性和更好的保护作用，如下图所示。在这项研究中，mrna疫苗或安慰剂在两次接种计划中(间隔28天)肌肉注射，每组包括5只动物。第28天用寨卡病毒对NHPs进行攻击，用定量PCR方法测定攻击后病毒滴度。计量是以焦点形成单位来量化的。

mrna-1893序列在非人类灵长类动物挑战研究中提供了与mrna-1325类似的保护。

寨卡疫苗(mR-1893)：临床资料

我们正在美国进行mrna-1893的第一阶段试验，我们不会进一步开发mrna-1325。

我们目前正在进行第一阶段的随机、观察者盲、安慰剂对照、剂量范围的研究，以评估mrna-1893在地方性和非地方性寨卡地区的安全性、耐受性和免疫原性(18至49岁，包括在内)。mRNA-1893按两次接种方案(间隔28天)在4个剂量水平(10克、30克、100克和250克)肌肉内注射。这项研究的主要目标包括：

受试者随机按4：1的比例随机分配，在四个剂量水平(10克、30克、100克和250克)中接受mRNA-1893或安慰剂，每个受试者接受两次接种，间隔28天。每个剂量水平的登记参与者中有25人为黄病毒抗体阴性者，5人为黄病毒血清阳性者。

截止到2020年2月12日，我们已经招收了90名受试者，每组30名受试者分别为10克、30克和100克剂量组。

二.癌症疫苗模式中的程序说明

我们设计了我们的癌症疫苗模式，通过增强对肿瘤新抗原的免疫反应来治疗或治愈癌症，定义如下。这一模式目前有两个新抗原疫苗项目，一个是个性化的癌症疫苗，即PCV方案，另一个是针对与共同癌基因KRAS相关的新抗原的疫苗，这两个项目都是与默克公司合作进行的。癌症疫苗的目的是使病人的免疫系统安全地接触到肿瘤相关抗原，即新抗原，以使免疫系统产生更有效的抗肿瘤反应。我们的癌症疫苗模式主要是利用mRNA来表达在特定肿瘤中发现的新抗原，以便通过识别这些新抗原，从而识别肿瘤的T细胞引起免疫反应。这些新抗原可以是病人特有的，比如我们的个性化癌症疫苗计划，也可以是与患者之间发现的驱动癌基因有关，就像我们的KRAS疫苗项目一样。

我们的管道以两种格式显示，一张单元格图显示了我们的mRNA管道程序所处理的生物多样性，另一种传统格式显示了我们管道项目目前的发展阶段，在这份题为“业务-我们的管道”的10-K表格的年度报告一节中。

机会

据预测，2017年美国新增癌症病例超过160万例，死于癌症的人数约为60万人。尽管检查点抑制剂最近取得了成功，但大多数最常见的上皮癌患者仍未受益于检查点抑制剂，因为许多患者对目前可用的治疗仍然没有反应。此外，人们认为治疗抗药性产生于多种机制，主要是肿瘤细胞的局部免疫抑制效应，这些机制阻碍了T细胞的进入或识别。

近年来在肿瘤免疫治疗方面的突破，如检查点抑制剂和嵌合抗原受体T细胞治疗，已经证明通过激活抗原特异性T细胞可以获得强大的抗肿瘤反应。我们认为提高检查点抑制剂疗效的一种方法是开发疫苗，增加患者识别肿瘤新抗原的T细胞的数量和抗肿瘤活性。

我们的方法

我们正在开发基于mRNA的癌症疫苗，以利用T细胞的抗肿瘤杀伤能力来提高抗肿瘤效果。随着免疫治疗的进展，T细胞治疗某些癌症的证据在过去十年中有所增加。免疫系统的抗肿瘤反应依赖于T细胞识别肿瘤细胞为非自我，并消除这些“外来”细胞。人类白细胞抗原(HLA)复合体是一组不同的基因或等位基因，它们将来自内部(HLA I)或外部(HLA II)细胞的蛋白质片段表达到免疫系统中。一个人的HLA类型定义了他们所表达的HLA等位基因，并限制了他们的免疫系统可能呈现什么样的抗原。HLA分子中的抗原由CD4和CD8 T细胞表面的T细胞受体(TCRs)识别。这两大类T细胞具有不同的攻击肿瘤细胞的机制，CD4细胞在HLAⅡ分子抗原识别后激活其他免疫细胞中起重要作用，而CD8细胞在HLAⅠ分子抗原识别后具有直接杀伤细胞的能力。这两种细胞类型已被证明在推动有效的抗肿瘤免疫反应中具有重要作用。

在过去的三十年里，开发癌症疫苗的尝试很多，但成功的却寥寥无几。主要原因包括：(1)以往的研究都是针对共同的“自我”非变异抗原；(2)几乎所有以前的尝试都是利用肽片段来模拟HLA I分子所显示的肽，这种方法可能无法模拟免疫系统对抗原的自然处理和呈现，因此可能无法被识别；(3)早期的工作是在检查点抑制剂之前的时代完成的。

我们认为提高检查点抑制剂疗效的一种方法是开发疫苗，增加患者T细胞识别肿瘤新抗原的数量和抗肿瘤活性。我们的癌症疫苗模式的重点是利用mRNA来表达在特定癌症中发现的新抗原，以便通过识别这些新抗原的T细胞来激发免疫应答，从而识别肿瘤。这些新抗原可以是独特的，比如我们的个性化癌症疫苗计划，也可以是与在不同的患者群中发现的癌基因相关的，就像我们的KRAS疫苗项目一样。

PCV(mRNA-4157和NCI-4650)：摘要

我们正与默克公司合作，利用我们平台的强大力量，开发出针对每个患者的多种肿瘤抗原的癌症疫苗，也就是个性化的癌症疫苗，即PCVS。

最近在癌症免疫治疗方面的突破表明，在不同的肿瘤环境中激活抗原特异性T细胞可以获得强大的抗肿瘤反应。尽管取得了这些进展，许多患者对抗癌治疗仍有不完全或没有反应.一种方法是管理一种癌症疫苗，该疫苗编码含有肿瘤突变的肽，即由病人肿瘤特有的新抗原组成的个性化癌症疫苗。以前的尝试已经证明了mRNA和基于肽的平台能够驱动对患者特异性肿瘤抗原的免疫反应。临床前的研究表明，癌症疫苗与检查点抑制剂的结合比单一药物疗法提供了更好的益处。我们的平台定位于为患者提供个性化的癌症疫苗，我们的专利是基于新抗原的mrna疫苗的硅化设计，与我们在美国马萨诸塞州诺伍德的mtc工厂的自动化无细胞制造流程和基础设施以及我们的数字基础设施相结合。我们相信，这些特性加上我们专有的LNPs有助于区分我们的方法和正在进行的开发基于mRNA的癌症疫苗的努力。mRNA-4157要么作为单一疗法，要么与彭布鲁克利祖马联合使用，在美国市场上被称为KEYTRUDA。这是与默克公司合作，由一个联合指导委员会管理。NCI-4650是一种个人化的癌症疫苗，由国家癌症研究所(Nci)作为一种针对晚期患者的单一疗法进行测试。, 转移性癌症。NCI-4650在其新抗原选择过程中与mRNA-4157不同.mRNA-4157的第一阶段试验正在美国进行，第二阶段的试验正在美国和澳大利亚进行。美国NCI-4650第一阶段试验于2019年11月完成。截至2020年2月12日，15例切除实体瘤(黑色素瘤、结肠癌和肺癌)患者在其原发肿瘤切除后接受mRNA-4157辅助单药治疗。另外56例转移性、未切除的实体肿瘤(黑色素瘤、膀胱、肺、结肠、前列腺、头颈部和子宫内膜癌)接受了至少一剂mR-4157与彭布罗利珠单抗联合应用。截至2019年6月，我们已经检测到抗原特异性T细胞反应在单一治疗臂和与彭布鲁克利祖马。我们还观察了一些接受mR-4157与彭布鲁克利苏单抗联合治疗的患者的临床活动情况。我们和我们的战略合作者默克公司在黑色素瘤患者中进行了佐剂mRNA-4157的第二阶段试验。

PCV(mRNA-4157和NCI-4650)：我们的产品概念

快速的，个性化的当前良好的制造实践，或cgmp，制造，为病人带来个性化的癌症疫苗。

随着肿瘤的生长，他们会获得突变，其中一些会产生新的蛋白质序列，或新抗原，这些新的蛋白序列可以出现在肿瘤的HLA分子上，并被T细胞识别为非自我。这些新抗原可以共享，如mRNA-5671，或完全独特的个别病人的肿瘤。除了肿瘤抗原是独特的和患者特有的，这些新抗原的出现也取决于患者的特定HLA类型。通过下一代测序结合我们的专利，在每个病人的mrna疫苗的硅设计和特定患者的快速制造中，我们可以快速地向病人提供一种完全独特和个性化的药物，从而识别患者特异性HLA类型和肿瘤新抗原。

我们认为，抗原编码的mRNA是一个有吸引力的技术平台，可用于癌症患者的新抗原疫苗接种，原因如下：

我们的个体化癌症疫苗程序，mRNA-4157，由一个mRNA组成，它编码多达34个新抗原，预测会引起I类(CD8)和II类(CD4)应答，针对每个患者的肿瘤突变和HLA类型而设计。NCI-4650包括已知的免疫原性的两种新抗原，这两种抗原都是通过对患者的免疫细胞进行体内实验确定的，也包括NCI生物信息学算法预测的新抗原。对于mRNA-4157和NCI-4650，肿瘤抗原以单一的mRNA序列编码，因此被称为新抗原复合物。每个病人特异性mRNA-4157和NCI-4650是在我们的专利LNPs设计的肌肉注射.下图显示了mRNA-4157和NCI-4650的设计意图。

每个mRNA-4157和NCI-4650都是使用一个完整的批量生产过程来生产的，而不管要生产的新抗原的顺序如何，这个过程都是相同的。整个过程涉及五个主要步骤，这些步骤高度一体化，旨在建立强有力的监管链和身份链。下图概述了该系统。

这一过程包括以下步骤：

具体而言，为每个病人收集肿瘤样本和外周血样本，并立即发送NGS分析。完整的外显子测序(WES)是从肿瘤和血液样本中产生的，血液样本作为生殖系(未发生突变)的参考。血液样本的WES结果也将用于使用基于NGS的方法来确定患者的HLA类型。肿瘤转录体由mRNA测序或RNA-Seq决定.HLA分型，WES，和RNA-Seq结果为我们的专有疫苗设计算法提供了输入，该算法预测哪些新抗原可能是最具免疫原性的。然后使用自动化工作流来制造mRNA序列，以实现快速的周转时间。最终的药物产品被运送到临床现场进行管理，给提供原始活检的同一个病人。

PCV(mRNA-4157和NCI-4650)：临床前信息

我们使用模型抗原作为PCV的代孕物，以证明它有能力通过单个mrna激发一个强大的T细胞反应。

我们已经完成了临床前的研究，以表征一个mRNA疫苗的能力，以诱导一个强大和特异的T细胞对多种抗原的反应。具体来说，我们的mRNA疫苗有能力激发：

小鼠对mrna pcv的T细胞反应

小鼠研究中独特的T细胞对mRNA编码的特异性抗原的应答

PCV(mRNA-4157和NCI-4650)：临床数据

我们的第一阶段PCV试验目前正在美国进行，我们的第二阶段PCV试验目前正在美国和澳大利亚进行。

第一阶段试验是一个开放标签的多中心研究，以评估mR-4157单用mR-4157在切除实体肿瘤患者中的安全性、耐受性和免疫原性，并与CPI、pbrolizumab(在美国市场上称为KEYTRUDA)相结合，评估无法手术的实体肿瘤患者的安全性、耐受性和免疫原性。这项研究是由我们赞助的。mRNA-4157在每21天周期的第一天肌肉注射，最多可注射9次。mRNA-4157在美国作为单一疗法(A部分)或与彭布鲁克利祖马(B、C和D部分)联合使用。A、B两部分分别用剂量递增法探讨0.04mg、0.13mg、0.39mg和1mg的4种mRNA-4157剂量水平，即0.04mg、0.13mg、0.39mg和1mg。目前正在研究的癌症有：非小细胞肺癌(符合一定的进入标准)、小细胞肺癌、黑色素瘤、膀胱尿路上皮癌、人乳头瘤病毒阴性头颈鳞状细胞癌和多种实体恶性肿瘤。

这项研究的主要目标包括：

试验原理图见下图。

截至2020年2月12日，15例切除实体瘤(黑色素瘤、结肠癌和肺癌)的患者在其原发肿瘤切除后接受mRNA-4157作为辅助治疗。另外56例转移性、未切除的实体肿瘤(黑色素瘤、膀胱、肺、结肠、前列腺、头颈部和子宫内膜癌)接受了至少一剂mR-4157与彭布罗利珠单抗联合应用。

在A部分(单药)mRNA-4157的剂量增加中，我们检测到抗原特异性T细胞反应。这是通过再刺激未扩大的外周血单个核细胞与与患者特异性mR-4157编码的新抗原相对应的肽组来测量的，如下图所示。个别数据点表示技术复制。

PCV疫苗临床试验A期(mR-4157)中1例患者在0.13 mg剂量水平下的抗原特异性T细胞应答

截至2019年6月，mRNA-4157在研究的所有剂量水平上都具有良好耐受性，没有剂量限制毒性，也没有3级或4级不良事件(AES)或SAES报告为单一治疗或联合使用彭布罗利祖马(Pbrobrolizumab)。最常见的2级不良反应是疲劳、注射部位疼痛、结肠炎和肌萎缩。一组处于最高剂量水平(1mg)的患者正在接受免疫原性应答的分离和更深入的表征。截至2019年6月，其中一名患者的数据显示，肿瘤抗原特异性的CD8-T细胞应答在这4种肿瘤后检测到的18种Ⅰ类肿瘤抗原中的10种。^TH疫苗的剂量(基线时为0/18)。20例患者中有6例出现临床反应(1例完全应答+5例部分反应)，剂量范围为0.04-1.0mg。在给药前单用麻风利珠单抗，反应完全。在五个部分反应中，有两个出现在以前接受检查点抑制剂治疗的病人身上。在13名接受辅助mR-4157单药治疗的患者中，所有患者都完成了根据研究方案进行的全程免疫接种。11例患者在研究后75周内仍保持无病状态。

NCI-4650是由国家癌症研究所赞助的一项由研究人员发起的、单臂开放标签试验，涉及多达12名晚期转移性疾病患者。这一审判已于2019年11月结束。

我们和我们的战略合作者默克公司(Merck)正在进行一项随机的第二阶段研究，以评估术后使用mrna-4157的辅助治疗是否与单用彭布鲁克利苏单抗相比，是否能提高无复发生存率。这项研究的主要终点是无复发生存，初步分析在12个月，并将对已经完全切除皮肤黑色素瘤，但仍处于高风险复发的病人进行。截至2020年2月12日，25名患者服用了mR-4157或单用彭布罗利单抗。

第二阶段试验的原理图见下图。

KRAS疫苗(mR-5671)：摘要

与默克公司合作，我们正在开发一种癌症疫苗(mrna-5671)，该疫苗的mRNAs编码kras癌基因蛋白的突变。

虽然单药检查点抑制剂治疗可为某些癌症患者提供显著的益处，但许多患者对治疗的反应不完全或没有反应，因此需要替代疗法来刺激抗肿瘤免疫反应。发现致癌的驱动突变编码的目标T细胞表位有相当大的治疗意义。KRAS基因的点突变发生在约22%的人类癌症中，如结直肠癌、非小细胞肺癌和胰腺癌。KRAS的直接抑制已被证明具有挑战性，到目前为止，还没有成功的KRAS靶向癌症治疗方法。据报道，KRAS-突变型新抗原可在某些人类HLAs上表达.因此，一种方法是免疫人体自然合成含有常见KRAS突变的新抗原肽，通过mRNA将其呈现给免疫系统。我们设计了一种mRNA，从四种最常见的KRAS突变中产生KRAS新抗原并将其呈现给免疫系统。我们把Ind转到了默克，因为默克是第一阶段试验的发起人。第一阶段的试验由默克公司进行，目前正在美国进行。患者要么服用mR-5671作为单药，要么与检查点抑制剂pbrobrolizumab联合使用。

KRAS疫苗(mR-5671)：我们的产品理念

我们的方法是编码多个突变的KRAS在我们的mRNA疫苗与一个检查点抑制剂。

编码可靶向T细胞新抗原的致癌基因突变具有相当大的潜在治疗意义：(1)驱动基因突变受到阳性选择，因为它们为肿瘤提供了生存优势；(2)这些肿瘤抗原可以在患者之间共享，从而使开发和制造此类治疗或治疗干预措施更容易。

KRAS是上皮癌(主要是肺癌、结直肠癌、大肠癌和胰腺癌)中经常发生突变的癌基因。与这些恶性肿瘤相关的四种最常见的KRAS突变是G12D、G12V、G13D和G12C，占KRAS突变的80%~90%。KRAS有多条下游信号通路，虽然药物已经开发成针对单个效应的药物，但直接抑制KRAS可能更有效。对KRAS的直接抑制已经被证明是具有挑战性的，就像过去研制抗KRAS的癌症疫苗一样。这些尝试已被证明是无效的，可能是由于缺乏同时使用检查点抑制剂或疫苗，而疫苗只具有最低的免疫原性。历史上对KRAS疫苗的任何尝试都没有使用mRNA。

免疫刺激剂通常被纳入疫苗中，以提高对感兴趣的抗原的免疫反应。干扰素基因刺激因子是一种已知可触发1型干扰素应答的胞浆核苷酸传感器，已被报道可促进抗原特异性T细胞应答。有报道称，SING可促进抗肿瘤免疫，包括刺痛激动剂(如环状二核苷酸)在内的疫苗对低免疫原性抗原的免疫反应总体上有所改善。默克公司选择在没有刺痛基因的情况下提升mRNA-5671，并可能选择将SINGmRNA纳入该疫苗的进一步临床开发。

为了驱动T细胞介导的抗肿瘤反应，我们的mRNA疫苗包括一个编码编码四个最常见的KRAS突变的序列的mRNA，封装在我们专有的LNP中。我们的mRNA疫苗将作为单一疗法或与检查点抑制剂联合使用。下图显示了mRNA-5671的一种方法.

KRAS疫苗(mR-5671)：临床前信息

我们观察了krasmRNA疫苗在体内的应用。

我们的KRAS疫苗的免疫原性得到了一些临床前研究的支持，我们观察到我们的编码KRAS突变的mRNA可以在细胞中表达，并在具有特定HLAI等位基因的转基因小鼠中表达。

其中一个模型是表达人类HLA的转基因小鼠模型。如下图所示。这些转基因小鼠接种了编码A11阳性对照抗原(对照组)的mRNA、单个突变的KRAS新抗原或四种最常见的突变型KRAS新抗原(KRAS新抗原)的复合物，再加上编码钩吻的mRNA。第1天和第15天以LNP表达，第1天和第15天肌肉注射T细胞，用培养液、野生型或突变型KRAS肽(A-KRAS突变1和B-KRAS突变2)刺激脾细胞，于第22天检测T细胞的反应。用KRAS突变1肽和KRAS突变2肽刺激脾细胞后，检测到特异性抗原特异性CD8+干扰素γ+T细胞应答。

KRAS突变1肽对小鼠T细胞再刺激的应答KRAS突变1肽的mrna疫苗研究

小组(A)

KRAS突变2肽对小鼠T细胞再刺激的应答KRAS突变2肽的mrna疫苗研究

小组(B)

KRAS疫苗(mR-5671)：临床计划

默克公司正在领导kras疫苗项目的临床开发，并正在进行第一阶段的试验。

默克公司正在进行一项开放标签、多中心、剂量提升和剂量扩张阶段第一阶段的研究，以评估mR-5671作为肌肉注射的安全性和耐受性。第一阶段的试验正在美国进行。

三、肿瘤内免疫肿瘤学模式中的程序描述

我们设计了肿瘤内免疫肿瘤学方法，通过改变肿瘤的微环境来促进抗肿瘤T细胞对肿瘤的反应，从而治疗或治愈癌症。这一模式目前有三个方案。我们的mRNA技术允许多种治疗方法的结合，这些药物可以直接注射到肿瘤中，目的是激活肿瘤微环境，杀死注射肿瘤和远端肿瘤中的癌细胞，即所谓的超广谱效应。瘤内给药允许这些治疗药物的局部作用，如果系统地给药，可能是有毒的。

我们的管道以两种格式显示，一张单元格图显示了我们的mRNA管道程序所处理的生物多样性，另一种传统格式显示了我们管道项目目前的发展阶段，在这份题为“业务-我们的管道”的10-K表格的年度报告一节中。

机会

据预测，2017年美国新增癌症病例超过160万例，死于癌症的人数约为60万人。近年来，免疫介导疗法在治疗癌症方面取得了一些进展.然而，许多晚期癌症患者的前景仍然很差，特别是在免疫系统很少参与的肿瘤中，因此被称为免疫“寒冷”。我们的目的是激活肿瘤微环境与我们的mRNA治疗，与检查点抑制剂，以激活免疫系统，以抵御这些其他免疫寒冷的肿瘤。

我们的方法

我们的肿瘤内免疫肿瘤学模式侧重于驱动健壮的、特异的抗肿瘤T细胞反应，将具有免疫抑制性微环境的冷肿瘤转化为免疫“热”的肿瘤，从而产生高效的抗癌免疫反应。我们的目标是发现和发展局部注射或瘤内免疫介导的治疗方法，以提供有效的免疫刺激蛋白的mrna编码，这些蛋白质可以在注射肿瘤的部位起作用，减少全身毒性，并有可能在远端肿瘤部位受到影响的情况下产生“超广谱效应”。这些可能与检查点抑制剂结合，以促进反应。在这种模式下，所有的mRNAs都被设计成通过引入微RNA结合位点来减少肝细胞中蛋白质的含量，从而潜在地减少了非靶点效应，并产生了更好的耐受性。

早期其他人在肿瘤内免疫介导疗法的效用方面的努力已经在小鼠的癌症模型中建立起来。在我们的许多临床前研究中，我们把重点放在展示小鼠的生物活性和功效上，我们使用了编码小鼠同源基因的代用品mRNAs，因为人类蛋白在小鼠中可能没有足够的交叉反应，而且人类蛋白在小鼠中的使用可能会引起抗异型蛋白免疫反应。

OX40L(mRNA-2416)：摘要

肿瘤内注射OX40LmRNA表达膜T细胞共刺激因子OX40L增强肿瘤微环境特异性T细胞应答的免疫学研究

最近在通过激活免疫系统来治疗癌症方面取得了一些进展。然而，许多晚期癌症患者对很少的治疗有反应，并继续面临一个糟糕的前景。激活免疫抗肿瘤反应，同时降低全身毒性的替代策略是必需的。为此，我们开发了一种野生型OX 40配体(OX40L)的mRNA治疗编码蛋白。OX40L蛋白是一种通常在免疫刺激时在抗原提呈细胞上表达的膜蛋白，可增强活化的免疫应答。mRNA-2416编码野生型OX40L，这是一种膜蛋白，我们认为不能通过重组技术制造这类蛋白质供肿瘤细胞使用。mR-2416正被开发用于治疗局部瘤内注射后的实体肿瘤.我们目前正在赞助一项在美国进行的第1/2阶段试验。作为本试验的一部分，我们修改了该方案，在晚期卵巢癌患者中加入了第1期剂量增加队列，与杜洛马抗体联合使用，然后在第二阶段扩展队列，因为我们预计mRNA-2416与杜鲁巴的协同活性。

截至2020年2月12日，41例患者服用mR-2416(39例单药，2例联合用药)。截至2018年10月22日，对26例患者进行了mRNA-2416单药治疗的疗效评价，以稳定期疗效最好(n=6)。2例卵巢癌患者在注射和/或未注射病灶中均有肿瘤缩小的临床观察。在这些临床观察的基础上，我们选择在晚期卵巢癌患者中将试验扩展到第二阶段。

OX40L(mRNA-2416)：机械概述

OX40L是一种T细胞共刺激因子。

最佳T细胞反应的产生需要T细胞受体(TCR)参与所呈现的抗原表位(如肿瘤抗原)和通过共同刺激分子(如OX 40)获得的阳性次级信号。OX 40受体(又称TNFRSF 4或CD 134)是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的成员之一，在TCR激活后，OX 40受体在活化的免疫效应细胞上被上调。OX 40是由OX40L内源性刺激的，OX40L是一种正常在专业抗原提呈细胞上表达的同三聚体膜蛋白。在已知抗原存在下，OX40L与OX 40结合，可促进CD4和CD8 T细胞的增殖，增强T细胞效应功能，提高经验T细胞的存活率，提高记忆能力。以前用激动剂抗体激活OX 40的临床尝试可能由于抗体与其他细胞的相互作用而受到阻碍。我们认为通过mRNA在肿瘤部位引入OX40L可能会促进T细胞的应答，我们认为OX40L基因的瘤内注射可能是增强抗肿瘤免疫的一种有吸引力的方法。

OX40L(mRNA-2416)：我们的产品概念

我们的方法是将OX40LmRNA通过瘤内脂质纳米颗粒来产生膜型T细胞共刺激物。

我们的产品由编码OX40L人类序列的mRNA组成，OX40L由我们专有的LNP组成。mRNA-2416的目的是通过引入一个微RNA结合位点来减少肝细胞中蛋白质的含量，从而降低离靶效应，从而获得更好的耐受性。肿瘤内注射后，肿瘤特异性T细胞克隆的增殖和迁移有望诱导特异性的抗肿瘤免疫应答，这也可能导致全身抗肿瘤反应。下图显示了我们对这一程序的处理方法。这一发展候选人的早期概念包括遗留的利比里亚国家警察。然而，我们在一项IND-使GLP毒理学研究中观察到了足够的毒性发现，从而放弃了遗留的LNP。当开发候选药物从遗留的LNP转移到我们的专有LNP时，毒性发现大大减少了。

OX40L(mRNA-2416)：临床前信息

我们已经用我们的方法证明了抑制小鼠癌症模型中肿瘤生长的能力。

荷瘤小鼠OX40LmRNA在肿瘤微环境中产生OX40L蛋白，在小鼠体内引流淋巴结。观察小鼠OX40L(简称mOX40L)在同基因模型中的活性，包括H22肝细胞癌模型。采用该模型，将H22癌细胞皮下植入BALB/c小鼠的侧翼。肿瘤生长后，小鼠随机分为治疗组和瘤内注射组，每周注射mOX40L编码mRNA或阴性对照mRNA。在同一基因H22小鼠模型中，每周重复注射mOX40LmRNA可导致50%的mOX40LmRNA治疗小鼠在研究结束时没有任何可测量的疾病。负对照mRNA和编码小鼠OX40L的mRNA分别以灰色和红色描述小鼠的存活情况，如下图所示。在肿瘤植入后第8天、第16天和第24天，用LNPs配制的7.5mrgmRNA治疗H22皮下肿瘤小鼠。用mOX40LmRNA治疗的12只小鼠中，6只为完全应答者，100天时未发现肿瘤负担，而LNPs中表达的阴性对照mRNA无完全应答。通过考虑将小鼠从研究中移除的任何原因绘制存活曲线，包括预定的2000 mm肿瘤负担终点。 ³，作为生存事件。

我们进一步证明了OX40LmRNA治疗后的抗肿瘤免疫记忆的产生，因为在6个初次完全反应的小鼠身上，同样的H22癌细胞未见肿瘤生长。

H22同基因小鼠OX40LmRNA 50%完全应答者(n=12)的模型研究

在MC38-S结肠癌小鼠模型上，研究了肿瘤内OX40LmRNA在大剂量检查点抑制剂(CPI)难治性环境中的潜在作用。本研究以mOX40LmRNA(每周6次瘤内注射5.0g mOX40LmRNA或阴性对照mRNA)或CPI抗体(每周5次腹腔注射10 mg/kg抗Pd-L1抗体或同类型对照抗体)单独或联合mOX40LmRNA+抗PD-L1治疗小鼠。mOX40LmRNA+抗Pd-L1抗体联合治疗15只动物中有8只(53%)肿瘤完全消退，而15只小鼠中只有0~2只对mOX40LmRNA或抗Pd-L1单抗(和阴性对照)有完全反应。

我们进一步证明了OX40LmRNA+αPD-L1治疗后的抗肿瘤免疫记忆的产生，因为在8名初次完全应答者中，同样的MC 38细胞未见肿瘤生长。

53%的完全应答者(n=15)在MC 38(CPI难治性)中使用小鼠OX40LmRNA+αpd-L1。

小鼠模型研究

OX40L(mRNA-2416)：临床数据

我们的中期数据表明，OX40LmRNA的肿瘤内治疗没有剂量限制毒性，并导致了两例卵巢癌患者肿瘤消退的临床观察，但在美国的第1/2期试验中，剂量的肿瘤消退并不符合RECIST的部分反应标准。

mR-2416的第1/2期试验是一项开放的、多中心的研究，对在美国的晚期复发/难治性实体肿瘤恶性肿瘤和淋巴瘤中重复注射mR-2416进行肿瘤内注射。mRNA-2416将在28天周期的第1天和第15天使用，最多6个周期。本阶段1/2研究的目的包括评估mR-2416在瘤内的安全性和耐受性，并确定最大耐受剂量和推荐的扩张剂量。其他终点包括药物动力学分析以及肿瘤免疫反应生物标志物的评估。试验单药臂的剂量水平分别为1mg、2mg、4mg和8mg。单疗法的研究已经完成，我们还没有计划将mRNA-2416作为单一治疗的扩展队列。我们已经启动了一个剂量发现队列，其剂量为4mgmRNA-2416，与杜洛瓦马(IMFINZI)联合使用，然后是卵巢癌的第二阶段扩张队列。

在这项研究的单一治疗组中，在完成安全队列之后，患者被纳入下列三个活检组之一：

试验设计的原理图如下图所示。

截至2020年2月12日，41例患者服用mR-2416(39例单药，2例联合用药)。截至2018年11月15日，报告了28例单药mR-2416治疗的安全性。在大约18%的患者中，我们观察到快速发作的多个二级和一个单一的三级可逆注射相关反应，所有这些都用抗组胺、皮质类固醇或补充氧来解决。报告了三种可疑的意外严重不良反应(SUSARs)。在这三种疾病中，有一种是上述3级严重不良事件(SAE)。第二例报告为二级非传染性全身炎症反应综合征，病人被留在医院过夜。在第三例中，一名被诊断为Ⅲ期卵巢癌的患者在治疗期间经历了皮肤溃疡，认为这是一种非严重的不良事件，位于注射肿瘤内，经mR-2416治疗后开始消退。最后一次注射mRNA-2416后，病人因个人原因退出试验后，伤口较小。随后，病人接受了用环磷酰胺/阿瓦斯丁进行疾病进展的额外治疗，伤口明显增大，由于病人的喜好和伤口愈合的担忧，阿瓦斯丁被停止治疗。病人随后因皮肤溃疡恶化而住院，当时发现注射的肿瘤没有出现(尽管有其他病变)。虽然不再在研究中，这项住院被研究者认为是一种怀疑意外的严重不良反应，与研究药物有关，但被我们认为可能与研究药物有关。出院后，病人死亡。据报道，这次死亡是由于疾病的进展。, 不是研究毒品。在其他患者瘤内注射mRNA-2416后，未观察到与研究药物有关的其他皮肤溃疡。

截至2018年10月22日，应用mR-2416治疗的26例患者中，以稳定型(n=6)疗效最好(n=6)，其中2例卵巢癌患者注射和/或未注射病灶肿瘤缩小。

在2018年10月22日之前，我们收集并分析了8例肿瘤注射前和注射后的mR-2416的配对活检。在这8例中，6例配对活检来自注射病灶，2例来自未注射病灶。在注射病灶的6对活检中，有3例肿瘤显示注射部位的位置，并有活组织从活检中分析，我们观察到注射后OX40L蛋白的增加。在其中一例中，我们观察了OX40L蛋白在注射病变中的表达，并在第1周期的第2天进行了活检，如下图中的定量免疫荧光染色所示。红色染色表示OX40L蛋白和4‘，6-二氨基-2-苯环吲哚(DAPI)染色DNA，以表示蓝色细胞核。绿色角蛋白染色表明角蛋白纤维常用于标记上皮性癌细胞。

mrna-2416对卵巢癌患者肿瘤细胞产生OX40L蛋白的影响

在注射病灶的6对活检中的其余3例中，我们没有观察到OX40L蛋白的增加，这可能是因为没有明显的注射部位或广泛的组织坏死。

OX40L/IL-23/IL-36γ(三重奏)(mR-2752)：摘要

我们的免疫肿瘤学方法：瘤内注射OX40L/IL-23/IL-36γ以改变肿瘤的微环境。

尽管最近在癌症免疫介导疗法方面取得了进展，但许多晚期癌症患者的前景并不乐观。我们正在开发Triplet(mR-2752)和其他程序，通过将冷肿瘤微环境转化为高效的、“更热”的免疫景观和局部肿瘤内治疗来驱动抗肿瘤T细胞反应。三联体(mRNA-2752)利用mRNA的固有优势，在单一的研究药物中，利用mRNA进行复合，产生膜蛋白和分泌蛋白。三重态体(mRNA-2752)包括三个编码人OX40L、白细胞介素23或IL-23的mRNAs，以及

白细胞介素36γ，或IL-36γ，封装在我们的专利lnp和口服瘤内.OX40L是一种膜蛋白，而IL-23和IL-36γ是分泌细胞因子.我们认为，与系统或瘤内注射重组蛋白相比，我们的方法具有IL-23和IL-36γ在局部高浓度梯度的优点。此外，OX40L的mRNA编码野生型膜蛋白，我们认为重组蛋白技术无法实现。联合使用OX40L、IL-23和IL-36γ在临床前癌症模型中显示出较强的活性，并且与检查点抑制剂具有协同作用。此外，这种组合引起了对远端肿瘤的抗肿瘤反应(通过“范围效应”)，以及临床前研究中治疗的肿瘤。三胞胎(mRNA-2752)的第一阶段试验正在进行中。

OX40L/IL-23/IL-36γ(三重奏)(mR-2752)：机械概述

三胞胎(mrna-2752)是设计和定制的，以两种方式激活免疫系统。

这种潜在的mrna药物是一种新的基于mRNA的治疗剂，含有多个mRNAs，编码野生型人OX40L、IL-23和IL-36γ蛋白，它们具有不同的功能，但在介导抗癌反应方面协同工作。三重奏(mRNA-2752)将两种方法引入到一种单一的多机制治疗中：

最佳T细胞反应的产生需要T细胞受体(TCR)参与所呈现的抗原表位(如肿瘤抗原)和通过共同刺激分子(如OX 40)获得的阳性次级信号。OX 40受体(又称TNFRSF 4和CD 134)是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的成员之一，在TCR激活后，OX 40受体在活化的免疫效应细胞上被上调。OX 40是由OX40L内源性刺激的，OX40L是一种正常在专业抗原提呈细胞上表达的同三聚体膜蛋白。在已知抗原存在下，OX40L与OX 40结合，可促进CD4和CD8 T细胞的增殖，增强T细胞效应功能，提高经验T细胞的存活率，提高记忆能力。因此，通过mRNA导入OX40L可能会促进T细胞的应答。我们认为，除了通过OX40L表达促进T细胞反应外，治疗后肿瘤内促炎细胞因子的表达可能有助于点燃免疫冷肿瘤微环境，并将其转化为有效的抗癌免疫反应。最初的焦点是细胞因子，这些细胞因子在启动炎症和架桥人类适应性免疫的过程中发挥了良好的作用，即IL-1家族和IL-12家族。具体来说，通过将IL-1家族成员IL-36γ导入到小鼠癌前模型中，可以观察到抗肿瘤作用。IL-12家族成员，包括IL-23，通常被称为免疫应答的中央协调者，主要是因为他们有能力连接先天的适应性免疫。

OX40L/IL-23/IL-36γ(三重奏)(mR-2752)：我们的产品理念

mRNA在肿瘤多免疫刺激途径中的潜在优势

我们正在开发三胞胎(mRNA-2752)，作为单一药物或与检查点抑制剂联合治疗晚期或转移性实体肿瘤、恶性肿瘤或淋巴瘤。三重态RNA(mR-2752)包括三个编码OX40L、IL-23和IL-36γ的mRNAs，它们封装在我们专有的lnp中.三重体(mRNA-2752)被设计成在局部肿瘤环境或淋巴结的细胞中制造这些蛋白质。我们的方法具有两个重要的细胞因子IL-23和IL-36γ的局部梯度的潜在优势，而不是全身注射或瘤内注射细胞因子蛋白，从而导致肿瘤的快速扩散。此外，OX40L的mRNA编码野生型膜蛋白，无论是对肿瘤还是作为一种能够共同刺激T细胞的重组膜蛋白，这都将是一个挑战。IL-23的mRNA产生了IL-12B和IL-23A亚基的单链融合蛋白，在两个亚基之间有一个连接子。IL-36γ的mRNA能产生一种含有信号肽的蛋白质，从而绕过上游加工释放和活性的需要。此外，这三种mRNA的设计都是为了通过引入微RNA结合位点来减少肝细胞中蛋白质的含量，从而降低离靶效应，从而获得更好的耐受性。图中显示了我们对三重奏(mR-2752)的处理方法。

OX40L/IL-23/IL-36γ(三重奏)(mR-2752)：临床前信息

OX40L/IL-23/IL-36γ联合应用对注射和未注射肿瘤小鼠的杀伤作用，同时具有持续的T细胞效应。

如前所述，临床前的工作是用小鼠同系物进行的。联合应用OX40L/IL-23/IL-36γmRNAs，在两只MC 38同基因小鼠肿瘤模型上的完全应答率为70%~100%，一种是正常反应，另一种是对系统检查点抑制剂治疗完全无效。三联疗法的疗效优于单独和双元mRNA组合。在一项研究中，携带双侧MC38-S肿瘤的小鼠只在右侧肿瘤内注射总mRNA 5g(每组2.5g/只，三胞胎组1.67g/只)。生存图如下图所示。当动物超过预定的2，000毫米肿瘤负担终点时，就会触发生存事件。 ³(两种肿瘤合并)。由于其他原因而被移除的动物在第100天之前被检查并显示为水平线。每组20只，肿瘤植入后100天，IL-23/IL-36γ、IL-23+OX40L和OX40L/IL-23/IL-36γ治疗组分别有10、11和20只完全应答者(即肿瘤部位均无可测疾病)。我们还发现，单剂量的OX40L/IL-23/IL-36γ可以诱导治疗和远端的完全疾病控制，有时被称为越野效应。这突出了我们的方法的潜力，导致一个良好的耐受性和广泛积极的治疗多发性和转移性癌症的治疗。

小鼠OX40L/IL-23/IL-36γ基因在MC 38双侧同基因小鼠模型中100%(n=20)的完全应答

除了OX40L/IL-23/IL-36γ的单药作用外，我们还观察到单次优化剂量的OX40L/IL-23/IL-36γ与系统给药的抗Pd-1/Pd-L1和抗CTLA 4抗体具有协同作用，再次显示出完全应答率>70%。

OX40L/IL-23/IL-36γ(三重奏)(mR-2752)：临床计划

三胞胎的第一阶段试验(mRNA-2752)正在美国和以色列进行。

我们正在进行的第一阶段的研究是作为一个开放标签的，多中心的三胞胎注射(mRNA-2752)单独或联合杜鲁伐单抗(抗PD-L1)的多中心研究。本研究的目的包括：

临床试验设计的原理图如下图所示。我们已经向FDA提交了一份协议修正案，将手臂C，mRNA-2752与震颤马抗联合去除。

该研究包括2个剂量上升部分和2个剂量确认部分，然后是武器B.mRNA-2752的剂量扩展，评估值分别为0.25、0.5、1、2、4和8毫克。mR-2752在第1周期每两周给药一次，第2~6周期每4周给药一次，每4周给药一次。活检和血液样本将收集治疗前后的剂量增加和剂量扩张，以评估蛋白质表达和肿瘤免疫景观的变化。

截至2020年2月12日，26例患者服用了mR-2752，其中16例采用单药治疗，10例联合用药。

I-12(MEDI 1191)：摘要

我们的免疫肿瘤学方法改变肿瘤微环境：IL-12是一种与阿斯利康合作的局部分泌蛋白。

免疫冷肿瘤患者的另一种策略是通过将促炎细胞因子直接导入肿瘤或引流淋巴结来改变肿瘤的微环境。与阿斯利康合作，我们正在开发MEDI 1191，这是一种IL-12的mRNA封装在我们的专利LNP，将提供瘤内。在早期临床试验中，全身注射重组IL-12蛋白的耐受性较差，反应率一般较低。MEDI 1191对抗原提呈细胞和T细胞均有增强免疫应答的作用，与全身蛋白治疗相比，IL-12的局部、瘤内表达可提高机体的耐受性。阿斯利康正在为MEDI 1191进行一期临床试验，该试验将与检查点抑制剂联合使用。

I-12(MEDI 1191)：机械概述

IL-12是一种强大的免疫调节剂，能连接先天和适应性的反应。

IL-12家族成员通常被称为免疫反应的中央控制器，因为他们能够从先天免疫过渡到适应性免疫。IL-12是一种强效的免疫调节剂，通常与1型免疫反应和干扰素-γ的产生有关.虽然使用IL-12的临床前研究已经在同基因癌模型中产生了显著的抗肿瘤作用，但系统地应用重组IL-12的临床发展受到全身毒性的影响。

IL-12(MEDI 1191)：我们的产品理念

与阿斯利康合作，我们正在开发IL-12与检查点抑制剂相结合的肿瘤内传递物。

肿瘤内注射IL-12是克服全身给药毒性的可行途径。例如，在转移性黑色素瘤患者的一期研究中，肿瘤内注射含IL-12的DNA质粒，然后电穿孔，显示了与彭布罗利珠单抗联合应用的有前景的活性。这种方法可能仅限于可供电穿孔的可接近的病变。相反，可能更可行的注射我们的mRNA由我们的专有LNP都可以到达和内脏肿瘤。

MEDI 1191正与检查点抑制剂联合用于治疗晚期或转移性实体肿瘤。MEDI 1191由我们的专利LNP组成，它包被人IL-12B(P40)和IL-12A(P35)亚基的mRNA。该mRNA产生一个单链融合蛋白的IL-12B和IL-12A亚基，与连接之间的亚单位。该mRNA序列已被设计用于促进蛋白质的产生，并旨在减少肝细胞中可能产生的蛋白质数量，以获得更好的耐受性。下图显示了我们对IL-12的处理方法.

IL-12(MEDI 1191)：临床前信息

我们进行了几项临床前研究，在这些研究中我们用我们的方法观察了活动。

如前所述，我们的临床前工作是用小鼠的IL-12同源基因进行的.在我们所描述的肿瘤模型中，检查点治疗是完全不可能的，并且与免疫抑制性肿瘤微环境有关，

IL-12可使肿瘤微环境发生改变，自然杀伤细胞和树突状细胞明显活化，细胞毒性淋巴细胞增多。在这种肿瘤的检查点抑制剂难治性小鼠模型中，单个剂量的IL-12mRNA作为一种单药产生的完全应答率约为30%，如下文A面板所示，并与系统注射抗PD-L1抗体(αPD-L1)协同作用，显示完全应答率>70%，如下图B面板所示。x轴代表皮下植入MC38-R肿瘤细胞后数天.第11天为mRNA处理，第11、14、18和21天为抗体处理。所有抗体处理均在20 mg/kg时进行。每组15只。通过考虑将小鼠从研究中移除的任何原因绘制存活曲线，包括预定的2000 mm肿瘤负担终点。³，作为生存事件。NTC是一种非翻译控制的mRNA。局部给药IL-12mRNA与全身αPD-L1治疗的协同作用也存在于未直接给药的远端肿瘤。

约30%(n=15)剂量最高的完全应答者

小鼠IL-12mRNA在MC 38小鼠模型研究中的检测

小组(A)

大约70%(n=15)在最高剂量测试时完全反应。

小鼠IL-12mRNA与αPD-L1抗体在MC 38小鼠模型研究中的应用

小组(B)

IL-12(MEDI 1191)：临床计划

阿斯利康是MEDI 1191临床开发的发起者和带头人。

我们负责制作一个临床前数据包，以支持IND/CTA归档和为早期临床发展提供临床供应。阿斯利康将引领早期临床发展。我们预计在临床试验中MEDI 1191的起始剂量比我们的其他肿瘤内计划要低。

一项开放标签的多中心第一阶段的临床试验中，肿瘤内注射MEDI 1191单独和与检查点抑制剂，杜鲁伐单抗正在进行中。

四、局部再生治疗模式中的程序描述

我们设计了我们的局部再生治疗模式来开发mRNA药物来治疗受伤或疾病的组织。我们在这种方式下的mRNA技术允许在局部产生蛋白质，从而在目标组织中提供治疗效益。我们以这种方式开发的AZD 8601用于当地生产VEGF-A的项目由我们的战略合作者AstraZeneca领导。这个项目最近完成了1a/b期的临床试验，在这个试验中，我们观察到了药物依赖蛋白的产生和药理学效应，这是通过患者局部血流的变化来测量的。我们相信这些数据为我们的mRNA技术提供了潜在的治疗机制的临床证据。

我们的管道以两种格式显示，一张单元格图显示了我们的mRNA管道程序所处理的生物多样性，另一种传统格式显示了我们管道项目目前的发展阶段，在这份题为“业务-我们的管道”的10-K表格的年度报告一节中。

局部再生治疗方式：机会

组织再生有多种应用。与阿斯利康，我们已经集中在缺血性心力衰竭的第一个项目。冠心病是缺血性心力衰竭的主要原因，它影响到为心肌提供血液供应的动脉。2015年，美国有366 000人死于冠心病，全球有890万人死于冠心病。

VEGF-A(AZD 8601)：方案摘要

将缺血性心力衰竭-VEGF-A与阿斯利康联合应用于局部治疗

在美国，心脏病是导致死亡的主要原因，占死亡人数的四分之一，而且通常是由于成年人无法再生心脏组织。目前批准的治疗方法并不是专门针对心脏再生。以前的心脏再生尝试包括干细胞移植和基因治疗，但在安全性或有效性方面面临挑战。在AstraZeneca的合作下，我们正在开创一种治疗缺血性心力衰竭的独特方法，在这种情况下，心肌无法获得足够的血液供应来履行其收缩功能。血管内皮生长因子A(VascularEndothelialGrowthFactor A，简称VEGF-A)能促进心脏组织的血管再该项目的目的是通过部分组织再生促进心功能的恢复。该程序中的mRNA是在没有LNPs的盐水制剂中，预计会在局部发挥作用。我们的战略合作者阿斯利康(AstraZeneca)对欧洲的糖尿病患者进行了1a/b期临床研究。这项研究已经达到了描述安全性和耐受性的首要目标，也达到了剂量依赖性蛋白产生和血流变化的次要目标。阿斯利康已经将这一计划转移到在欧洲进行的2a期试验，旨在测试接受冠状动脉旁路移植术的患者心外膜注射的安全性和耐受性。

VEGF-A(AZD 8601)：疾病概况

血管内皮生长因子-A可促进血管生长，潜在地治疗缺血性心力衰竭

在美国，心脏病是导致死亡的主要原因，占死亡人数的四分之一。冠心病，即冠心病，是缺血性心力衰竭的主要原因，它影响到为心肌提供血液供应的动脉。2015年，美国民航局造成366000人死亡，全球有890万人死亡。

有几种治疗方法可用于缺血性心力衰竭患者。目前的治疗方法包括重建冠状动脉以减轻症状和改善心功能；以及降低血压或可能有助于消除充血组织中过多液体的疗法，包括：β-阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素II抑制剂和醛固酮受体阻滞剂作为利尿剂。然而，成年人类无法在损伤后再生心肌组织，上述治疗方案无法弥补这一点。

VEGF-A是一种促进血管生长的强有力的血管生成因子.临床前资料提示，这种生长因子在缺血心脏中的表达可增加血流，部分恢复心功能。

VEGF-A(AZD 8601)：我们的产品概念

局部输注VEGF-A mRNA提高局部VEGF-A蛋白浓度同时降低治疗性VEGF-A蛋白的全身性分布

VEGF-A蛋白是血管生长的有力促进因子.全身注射血管内皮生长因子-A蛋白会增加全身的血管内皮生长因子-A暴露，这可能导致副作用，但在循环中是非常短暂的。因此，任何涉及VEGF-A的治疗都需要局部定位，以提高局部蛋白质浓度，推动血管再血管化，同时将系统副作用降至最低。阿斯利康(AstraZeneca)选择将VEGF-AmRNA应用于心肌中一种简单的盐水制剂中，以增加局部蛋白质产量，从而使局部蛋白质浓度在较长的时间内升高。这

与全身或局部注射VEGF-A重组蛋白相比，在注射的特定部位有可能产生更广泛的药效学效应。一些早期动物的mRNA，VEGF-A的工作是由我们的学术联合创始人肯尼斯博士发表在自然生物技术在2013年，显示改善心脏功能和提高生存率的治疗。

VEGF-A(AZD 8601)：临床前信息

阿斯利康(AstraZeneca)在几种临床前动物模型中观察了VEGF-A在缺血性心力衰竭中的活性。

在阿斯利康(AstraZeneca)进行了缺血性心力衰竭模型的临床前研究。在小鼠、大鼠和猪心肌梗死模型中，直接在心肌内注射VEGF-A mRNA，可提高心肌VEGF-A蛋白水平，改善心功能。这些数据已经由阿斯利康发表在2018年的分子治疗杂志上。下表说明AZD 8601在小猪心肌梗死后两个月及注射VEGF-A mRNA后的有益作用。在此表中，用超声心动图测定心肌梗死后第7天心内mRNA的左室射血分数(LVEF)。数据为均值±标准差。

小猪给药后2个月VEGFmRNA测定左室射血分数的显著改善

VEGF-A(AZD 8601)：临床资料

阿斯利康在德国完成了1a/b阶段的试验；芬兰目前正在进行第2a阶段的试验，并在荷兰为这项研究提出了另一项临床试验申请。

AZD 8601计划的第1a/b期临床试验已经达到了描述AZD 8601后蛋白质生产和血流变化的安全性和耐受性的主要目标。阿斯利康(AstraZeneca)已将该项目转移到第2a阶段的试验。

第1a/b期研究是对2型糖尿病患者进行的随机、双盲、安慰剂对照研究。前臂皮肤皮下注射VEGF-A mRNA，剂量为单次上升。这项研究是在欧洲进行的。主要目的是评估药物产品进入前臂皮肤的安全性和耐受性，并进行6个月的安全随访。

本研究分为A部分(单剂量组)和B部分(药效学组)。A部分有三种治疗方案：第1位为AZD 8601，第2位为安慰剂，第1位为安慰剂，第2位为安慰剂，第2位为安慰剂。每个方案包括在一个部位注射6次50升，在前臂第二个部位注射6次50升。在B部分，该方案包括在前臂四个部位各一次50升AZD 8601或安慰剂的皮下注射。

A部分患者27例，其中18例在前臂至少一个部位接受AZD 8601，9例接受安慰剂治疗。A部分为3组，每组9例。在第一组，AZD 8601剂量为每名病人24微克(每次注射4微克)。在接下来的两个剂量组中，AZD 8601剂量分别增加到72微克和360微克。B部分患者15例，每例患者前臂至少有两个部位接受AZD 8601治疗。在B部分，每个病人接受200克AZD 8601或安慰剂。

VEGF-mRNA注射后的蛋白在较高水平产生，高于设定的预期阈值，如下图所示。用皮肤微透析法检测其表达。在每个取样时间，所有队列患者的所有mRNA治疗位点的平均VEGF-A蛋白水平都高于安慰剂组，直到24~26小时。数据是带有误差条的平均值，显示平均值或扫描电镜的标准误差。星号表示p值

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